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產品詳情

YT246 PPAR凝膠遷移突變探針

  • 產品/服務:YT246 PPAR凝膠遷移突變探針
  • 型 號:YT246
  • 品 牌:百奧萊博
  • 單 價:面議 
  • 更新日期:2023-04-21
  • 有效期至:長期有效
  • 瀏覽次數:1103
產品簡介

PPAR凝膠遷移突變探針(1.75μM)是高品質的凝膠遷移EMSA產品,由北京百奧萊博供應,本產品僅用于生物化學研究方面,本產品質量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多PPAR凝膠遷移突變探針(1.75μM)等凝膠遷移EMSA產品請聯系我司咨詢訂購。...

產品詳細介紹

特別提示:包括PPAR凝膠遷移突變探針(1.75μM)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!


產品名稱:PPAR凝膠遷移突變探針(1.75μM)
英文名稱:PPAR Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
產品貨號:YT246
產品規格:60μl

本探針是用于EMSA(也稱gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突變體。可以作為EMSA探針-PPAR的陰性對照,用于EMSA結合反應中突變探針的冷競爭反應等。這里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。一個包裝的突變探針,如果用于同位素標記EMSA探針的突變探針冷競爭反應,可以進行30-60個突變探針的冷競爭反應。

PPAR consensus oligo的序列如下:
5"-CAA AAC TAG GTC AAA GGT CA-3"
3"-GTT TTG ATC CAG TTT CCA GT-5"

EMSA突變探針-PPAR中PPAR的公認的結合位點發生了突變,從而使PPAR無法和該突變探針結合。在探針冷競爭反應中,正常的標記探針和PPAR的結合的條帶會被抑制;而在突變探針冷競爭反應(cold competition)中,正常的標記探針和PPAR的結合的條帶不會被抑制。參考下圖。


一個典型的EMSA/Gel- Shift分析圖
1,陰性對照反應(標記探針);
2,常規反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針);
3,探針冷競爭反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記探針);
4,突變探針的冷競爭反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+標記探針100倍量的未標記突變探針);
5,Super-shift反應(含激活的目的轉錄因子的核蛋白+標記探針+目的轉錄因子的特異抗體)。

注意事項:
1. 避免加熱到40℃以上,溫度過高會導致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。
2. 對于EMSA的詳細操作可以參考我們的EMSA試劑盒的使用說明。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

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名稱:凝膠遷移探針生物素標記試劑盒
貨號:YT189
規格:20次
本試劑盒是通過TdT把生物素標記的dUTP添加到單鏈DNA 3"末端,然后通過退火產生生物素標記的EMSA探針的試劑盒。通常DNA的3"末端被標記后不會干擾基于序列特異性蛋白結合的EMSA檢測。Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依賴于模板的情況下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反應。關于TdT催化雙鏈DNA末端加dNTP的反應效率,3"端突出的雙鏈DNA要比平端或3"端縮進的雙鏈DNA高很多。TdT催化單鏈DNA末端加dNTP的反應效率要比雙鏈DNA高很多。在適當的條件下,TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反應。

本試劑盒適合標記純化的單鏈DNA,如果用于標記EMSA探針,可以在單鏈標記后再進行退火。本試劑盒中提供了已經用生物素標記好的Biotin-Control Oligo,可以用作檢測DNA標記效率的對照。如果每個標記反應的探針量為5pmol,本試劑盒可以用于20個標記反應。

試劑盒組份:
TdT Buffer(5X)———————————250μl
TdT(10U/μl)————————————20μl
Biotin-11-dUTP(5μM)————————100μl
Biotin-Control Oligo(0.4μM)————100μl
Ultrapure water———————————1ml
探針標記終止液———————————200μl
TE—————————————————15ml
退火緩沖液(10X)——————————150μl


儲存條件:-20℃。

名稱:封閉液(YT190專用)
貨號:YT191
規格:380ml
本封閉液是用于百奧萊博的化學發光法EMSA試劑盒(YT190)的專用試劑。化學發光法EMSA試劑盒中已經提供了適量的封閉液,但在某些需要使用較大量封閉液的情況下,可以購買本試劑用于化學發光法EMSA試劑盒的相關檢測。

儲存條件:4℃。


名稱:AP1凝膠遷移探針(1.75μM)
貨號:YT193
規格:60μl
本探針是用于EMSA(也稱gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide。這個雙鏈寡核苷酸含有公認的AP1結合位點,可以用作EMSA研究時的探針。

AP1 consensus oligo的序列如下:
5"-CGC TTG ATG ACT CAG CCG GAA-3"
3"-GCG AAC TAC TGA GTC GGC CTT-5"

本EMSA探針可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情況下進行標記,也可以用于生物素標記。

一個包裝的探針可以進行約30個同位素標記探針的反應,每次標記的探針可以測定約100個樣品;或約可以進行20個生物素標記探針反應。如果作為未標記的探針用于同位素標記探針的冷競爭(cold competition),可以進行30-60個冷競爭反應。

注意事項:避免加熱到40℃以上,溫度過高會導致雙鏈DNA探針解聚成單鏈。而單鏈無法用于EMSA研究。

儲存條件:-20℃,有效期一年。

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