BTN120700 利福平溶液

產(chǎn)品簡介
北京百奧萊博供應(yīng)的利福平溶液(13292-46-1)僅用于生物化學(xué)研究方面,本產(chǎn)品質(zhì)量好,且具價格,深為用戶稱道,了解更多利福平溶液(13292-46-1)等克隆與表達產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...
產(chǎn)品詳細介紹
特別提示:包括利福平溶液在內(nèi),本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱:利福平溶液
英文名稱:Rifampicin Solution
產(chǎn)品貨號:BTN120700
產(chǎn)品規(guī)格:10mL
本產(chǎn)品為濃度為100mg/mL的利福平溶液(溶劑為DMSO)。利福平(甲哌利福霉素;3-(4-甲基-1-哌嗪基亞胺甲基)利福霉素SV;Rifampin;Rifamycin AMP),分子式:C43H58N4O12,分子量:822.94,CAS號:13292-46-1。利福平是從利福霉素B得到的一種半合成抗生素,能抑制細菌DNA轉(zhuǎn)錄合成RNA,可抑制成熟病毒粒子DNA和蛋白質(zhì)的合成,是細菌核糖核酸聚合酶的特殊抑制劑,可用于治療結(jié)核病、腸球菌感染等。除作為抗生素應(yīng)用外,在分子生物學(xué)中可用做從細菌中去除質(zhì)粒的試劑利福平。
儲存條件:常溫運輸,4℃保存,有效期6個月。
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名稱:λDNA(不含N6-甲基腺嘌呤)
貨號:BTN90407B
規(guī)格:5μg
本產(chǎn)品Lambda DNA(λDNA)為λ噬菌體中的DNA,是一種常見的DNA底物,分子量為31.5×106Da/48502bp,濃度為200~500μg/ml。A型為普通Lambda DNA。B型為不含N6-甲基腺嘌呤Lambda DNA。C型為非甲基化的cl857 Sam7 λDNA,是從感染的大腸桿菌GM119菌株中分離得到的。該菌株缺乏dam及dcm甲基化酶活性。非甲基化的λDNA以作為對DNA甲基化敏感的限制性酶的底物。
儲存溶液:Tris-HCl(pH8.0)10mM;EDTA 1mM
儲存條件:低溫運輸、-20℃保存、有效期一年。
純度:
1. OD260nm/280nm>1.8。
2. 瓊脂糖凝膠電泳出現(xiàn)清晰單一條帶。
3. 1μg的λDNA在Hind III酶切Buffer中37℃保溫16小時后,瓊脂糖凝膠電泳時出現(xiàn)清晰單一條帶。
4. 1g的λDNA 用Hind III酶切(37℃,2小時)后,在瓊脂糖凝膠電泳時出現(xiàn)8條清晰的DNA電泳帶。
名稱:大腸桿菌Rosetta-gami (DE3)pLys化學(xué)感受態(tài)細胞
貨號:BTN130560
規(guī)格:0.1mL*10
Rosetta-gami(DE3)pLysS是Rosetta-gami(DE3)的的衍生菌株,用于具有毒性的含二硫鍵真核蛋白的表達。它是高度嚴緊表達宿主菌,包括Tunerlac 透性酶突變以及gor B/gor突變幫助細胞質(zhì)內(nèi)二硫鍵形成。
基因型:Δ(ara–leu)7697 Δ lac X74 Δ phoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F"[lac+lacIq pro](DE3)gor522::Tn10(TcR)gorB::kan plysS pRARE(CmR)
儲存條件:干冰運輸、-80℃保存,有效期半年。
自備試劑:目的DNA、SOC或LB培養(yǎng)基等。
使用方法:
1. 取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100μL,可以根據(jù)實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態(tài)細胞為例。
2. 待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm 振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復(fù)蘇。
5. 根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。
注意事項:
1. 涂布用量可根據(jù)具體實驗調(diào)整。若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較多,可取少量轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板;若轉(zhuǎn)化的DNA 總量較少,可取200-300μl轉(zhuǎn)化產(chǎn)物涂布平板。若預(yù)計的克隆數(shù)較少,可通過離心(4,000rpm,2分鐘)后吸除部分培養(yǎng)液,懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養(yǎng)基不易涂干,可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養(yǎng)。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存,如果次日的轉(zhuǎn)化菌落數(shù)過少,可以將剩下的菌液再涂布新培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
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