北京百奧萊博供應的大量PCR產物DNA純化試劑盒（用于科學研究，我公司專注于核酸電泳和回收產品的研發、生產和供應，為您提供的大量PCR產物DNA純化試劑盒（質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括大量PCR產物DNA純化試劑盒（20μg)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：大量PCR產物DNA純化試劑盒（20μg)
英文名稱：Mass DNA purification kits for PCR products
產品貨號：WH0044
產品規格：50次

本試劑盒使用獨特的離心吸附柱、專一地與DNA片段結合，同時zuì大限度除去蛋白質、離子及引物小片段等雜質。除了可用于PCR產物回收，對于一些酶反應液回收（酶切、連接、探針標記等）也同樣適用。可回收100 bp-20 kb DNA片段，回收率可高達80%以上（＜ 100bp或＞ 10 kb的DNA片段，回收率為30%-50%）。得到的DNA可直接用于連接、轉化、酶切、測序、雜交等分子生物學實驗。

產品特點：
·速度zuì快：15min完成DNA回收，可同時處理多個樣品，節省時間。
·步驟zuì少：操作簡單，幾次離心即可完成。
·效率zuì高：獨特的離心柱和精心配制的緩沖液保證每次zuì大量回收到純度高的目的DNA。
·處理量：每個離心吸附柱每次zuì多可吸附的DNA量為20μg。

試劑盒組成：

組分	50T
平衡液BL	30ml
結合液PB	60ml
漂洗液PW	15ml
洗脫緩沖液EB	15ml
吸附柱CB3	50個
收集管（2ml)	50個

保存條件：室溫（15-25℃）干燥條件下，可保存12個月，更長時間的保存可置于2-8℃。2-8℃保存條件下，若溶液產生沉淀，使用前應將試劑盒內的溶液在室溫放置一段時間，必要時可在37℃水浴中預熱10 min，以溶解沉淀。

注意事項：（請務必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項)
1．本試劑盒適用于無選擇性的回收溶液中所有DNA片段（可去除50 bp以下的小片段），如需選擇性回收特定片段，同時去除其他不同大小片段，請選擇膠回收試劑盒。
2．洗脫緩沖液加量應根據回收前DNA量來決定：如回收前DNA只有1-5 μg左右，則應選用少量型離心柱，加20-50μl洗脫緩沖液；回收前為5-20μg左右的DNA，應選用普通型離心柱，加30-100 μl洗脫緩沖液；如回收前有20-30 μg左右DNA，則應選用大量型離心柱，加50-300 μl洗脫緩沖液。
3．回收率與初始DNA量和洗脫體積有關，初始量越少、洗脫體積越少，回收率越低。
4．對于<100 bp和>10 kb的DNA片段可以適當的增加吸附和洗脫的時間。
5．平衡液BL的加入能夠改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和穩定性，消除高溫/潮濕或其他不良環境因素對吸附柱造成的影響。使用前請先檢查平衡液BL是否出現渾濁，如有混濁現象，可在37℃水浴中加熱幾分鐘，即可恢復澄清。
6．用平衡液處理過的柱子zuì好當天使用，放置時間過長會影響效果。

使用方法：
使用前請先在漂洗液PW中加入無水乙醇，加入體積請參照瓶上的標簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機在室溫下離心。

1．柱平衡步驟：向吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中）加入500 μl的平衡液BL，12000rpm（~13400×g)離心1 min，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。（請使用當天處理過的柱子）
2．估計PCR反應液或酶切反應液的體積，向其中加入5倍體積的結合液PB，充分混勻（無需去除石蠟油或礦物油）。
  注意：如PCR反應體系為100 μl（不包括石蠟油體積）,則加入500 μl結合液PB。
3．將上一步所得溶液加入一個吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），室溫放置2 min，12000rpm（~13400×g)離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放入收集管中。
  注意：吸附柱容積為800 μl，若樣品體積大于800 μl可分批加入。
4．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），12000rpm（~13400×g)離心30-60 sec，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱CB3放入收集管中。
  注意：如果純化的DNA是用于鹽敏感的實驗，例如平末端連接實驗或直接測序，建議PW加入后靜置2-5 min再離心。
5．重復操作步驟4。
6．將離心吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)離心2 min，盡量除去漂洗液。將吸附柱置于室溫放置數分鐘，徹底地晾干，以防止殘留的漂洗液影響下一步的實驗。
  注意：漂洗液中乙醇的殘留會影響后續的酶反應（酶切、PCR等）實驗。
7．取出吸附柱CB3放入一個干凈的離心管中，向吸附膜中間位置懸空滴加適量洗脫緩沖液EB，室溫放置2 min。12000rpm（~13400×g)離心2 min，收集DNA溶液。
  注意：洗脫液的體積不應少于50μl，體積過少會影響回收的效率。洗脫液的pH值對于洗脫效率有很大影響。若后續做測序，需使用ddH2O做洗脫液，并保證其pH值在7.0-8.5范圍內，pH值低于7.0會降低洗脫效率；且DNA產物應保存在-20℃，以防DNA降解。DNA也可以用緩沖液（10mM Tris-Cl,pH8.0)洗脫。為了提高DNA的回收量，可將離心得到的溶液重新加回離心吸附柱中，再次離心。

DNA濃度及純度檢測：
1．回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。
2．DNA應在OD₂₆₀處有顯著吸收峰，OD₂₆₀值為1相當于大約50μg/ml雙鏈DNA、40μg/ml單鏈DNA。
3．OD₂₆₀/OD₂₈₀比值應為1.7-1.9，如果洗脫時不使用洗脫緩沖液，而使用ddH2O，比值會偏低，因為pH值和離子存在會影響光吸收值，但并不表示純度低。

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名稱：超級電泳液
貨號：BTN151103
規格：100mL
本品是我司開發的超級核酸電泳液套裝，其中的溶液A含抗水解的核酸染料，用于配制瓊脂糖凝膠(溶液A也可用于電泳，但不經濟)；溶液B為不含染料的電泳液。

產品特點：
1.高濃度，溶液A和溶液B用去離子水稀釋100倍后可以直接用作配膠工作液和電泳工作液，100mL的產品可以配制10 L工作液。
2.低產熱，用溶液A配制的膠在溶液B配制的電泳液中電泳時可用30 V/cm的中等電壓(cm是指電泳槽兩電級之間的距離)，一般的mini膠電泳(如檢查PCR擴增)只需要5-10分鐘即可完成，比TAE和TBE快4-5倍(TAE和TBE電泳一般需要40分鐘)。當然，也可以按常規的電泳參數電泳，所需時間約為40分鐘左右。
3. 用本產品溶液A 配制的瓊脂糖凝膠可以在TBE和TAE緩沖液中低壓電泳。用TBE 配制的瓊脂糖凝膠也可以在本產品溶液B配制的電泳液中電泳(低壓中壓均可)。但用TAE 配制的膠不能在溶液B中電泳。
4. 用本產品電泳得到的DNA片段的膠回收率高于使用TAE和TBE電泳的膠回收，不影響后續的DNA膠回收和DNA連接等反應。
5.溶液A(配膠用)和溶液B(電泳用)均可以單獨購買。

產品組成：

成分	A型	B型
溶液A(配膠液，含染料)	100ml	-
溶液B(電泳液，不含染料)	-	100ml
說明書	1份	1份

儲存條件：常溫保存和運輸，有效期兩年。如果本產品有沉淀析出現象，請65℃水浴溶解后使用。

使用方法：
將本品溶液A用去離子水稀釋100倍(1mL溶液A加99mL去離子水)，混勻后直接用于配瓊脂糖膠，溶液B用去離子水稀釋100倍(1mL本產品加99mL去離子水)后直接用于做電泳液，其余操作跟TAE，TBE緩沖液一樣。需注意的地方是：

1.電壓：對一般minigel，一般可以用250-350V 跑5-10分鐘；對大的電泳槽，可用400-450V 跑5-10分鐘。若在電泳時發生電流或電壓逐漸下降的現象，請檢查電泳儀是否設置了電流上限或功率上限。若繼續存在，可能需要更換新的緩沖液。
2. DNA條帶扭曲：DNA樣品中所含SDS量過高時(SDS 主要來于上樣液)，DNA條帶將出現扭曲，影響實驗效果。建議使用不含SDS的上樣液，zuì好使用跟我公司超級電泳液兼容的上樣液。
3. 反復使用：本溶液A配制的電泳液至少可以重復使用2-3次，如果使用大電泳槽，可以重復使用的次數會更多。
4. TBE膠：已經用TBE電泳液配置好的瓊脂糖凝膠，如果不含EB，SYBR Green等染料，則可以直接放入本產品溶液A配制的電泳液中按上述電泳條件電泳(因為溶液A含染料，故不需要額外再加染料)。如果用TBE電泳液配置好的瓊脂糖凝膠含EB、SYBR Green或綠如藍等核酸染料，則可以直接在本產品溶液B配制的電泳液中進行電泳。
5.溶液A配制的膠在TAE或TBE電泳液中電泳：已經用本產品溶液A配置好的瓊脂糖凝膠，也可以直接在TBE或TAE電泳液中電泳，電壓跟常規TAE或TBE電泳一樣。

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