增強型蛋白印跡膜再生液的品牌是百奧萊博，是優質的免疫檢測產品，本制品用于科學研究，本品質量穩定，價位合理，需要增強型蛋白印跡膜再生液等免疫檢測產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括增強型蛋白印跡膜再生液在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：增強型蛋白印跡膜再生液
產品貨號：ZN1922
產品規格：100ml

產品保存：4℃保存，一年有效
產品說明：增強型蛋白印跡膜再生液能夠安全地從硝酸纖維素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗，且不會破壞抗原，從而再次檢測化學發光的免疫印跡。與重新跑一個SDS-PAGE 膠比較，不僅省時省力，而且可以消除重新上樣而帶來的誤差，使可比性更強。
產品特點：
1.不需重新制膠電泳
2.節省珍貴樣品，在同一張膜上使用相同的樣品重新檢測
3.，去除效果遠優于自制緩沖液
4.溫和配方，在抗體剝離及重新檢測時不會對靶蛋白造成傷害
5.不含硫醇，無刺鼻氣味
產品應用：
1.可重復使用硝酸纖維素膜或PVDF 膜，通過不同的一抗檢測不同的標靶
2.可重新檢測印跡，改正或優化初次實驗中無效的抗體濃度
注意事項：
1.剛從冷凍保存中拿出來會出現 SDS的沉淀，建議溫水溶解再使用。
2.建議先檢測表達量較低的目的蛋白，用再生液處理后檢測表達量高的蛋白。
3.本品適用于 NC 膜和 PVDF 膜，推薦使用 PVDF 膜，效果更佳。
4.本產品適用于 HRP 標記的二抗，且用化學發光法檢測的印跡膜。
需要材料：
1.化學發光底物
2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS
3.用于次和第二次蛋白質印跡實驗的一抗和二抗
4.膠片，化學發光成像儀
使用方法：
注：膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中，直到可以進行剝離程序。
1．將再生液用溫水溶解或室溫平衡至溶解。
2．用 TBS-T或PBS-T 將膜洗10分鐘×3次。
3．將印跡膜放入再生液中，室溫孵育20-30分鐘。使用足夠的體積以確保印跡膜完全潤濕(對于8×10cm 印跡需要約 20mL)。
注意：優化孵化時間和溫度對于獲得zuì佳結果是必不可少的。對于一些抗體，室溫孵育就足夠了。
然而，高親和力抗體可能需要再溫育5至10分鐘。
4.用 TBS-T或PBS-T將膜洗10分鐘×3次。
5.按如下方法檢測：
A.完整去除二抗的測試：將膜進行發光檢測，如果 5分鐘內未檢測到信號，則二抗已經成功地從抗原或一抗中去除。
B.完整去除一抗的測試：用 HRP 標記的二抗孵育膜，然后用洗滌緩沖液洗滌。孵育新的一抗和二抗，進行發光檢測，如果 5分鐘內沒有檢測到信號，則已經成功地將一抗從抗原中除去。
6.如果在步驟 5 中檢測到信號，則返回步驟 2，再剝離 5-15分鐘。一些抗原/抗體系統需要更高的溫度或更長的孵育時間來完全去除它們。優化剝離時間和溫度以確保完全去除抗體，同時防止對抗原的損傷。
7.確定膜被適當剝離后，可以進行第二次免疫印跡實驗。
注意：1.印跡可以剝離和重復檢測多次，但可能需要更長的曝光時間或更靈敏的化學發光底物。
如果抗原在再生液中變得不穩定，隨后的反應可能導致信號降低。
2.剝離后建議重新封閉印記膜。

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名稱：抗GST標簽瓊脂糖介質
貨號：WE0331
規格：100μl|500μl
抗GST標簽免疫親和介質是將抗GST標簽的單克隆抗體共價偶聯到瓊脂糖上，這種瓊脂糖能進行免疫沉淀或者免疫共沉淀，能檢測含有GST標簽的蛋白。

抗體類型：鼠單克隆抗體IgG1
免疫原：人工合成多肽序列
應用范圍：IP

名稱：BCA蛋白濃度測定試劑盒
貨號：ZN1871
規格：250次/500次/2500次
主要成份：
A 液 50ml
B 液 2.5ml
蛋白標準品 10ml(2mg/ml)
產品描述：應用試管法可以測量 25 管，微孔板法可以測量 250 孔。
產品保存：室溫保存，一年內有效。
產品說明：堿性條件下，蛋白將 Cu2+還原為Cu+,Cu+與 BCA 試劑形成紫顏色的絡合物，吸光度強度與蛋白濃度成正比。測定其在 562nm 處的吸收值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。
1.準確靈敏，線性范圍廣，BCA 試劑的蛋白質測定范圍是 20－2000μg/ml。
2.快速：45分鐘內完成測定。
3.經濟實用：在微孔板中進行測定，可大大節約樣品和試劑用量。
4.不受樣品中離子型和非離子型去污劑影響。
5.檢測不同蛋白質分子的變異系數遠小于考馬斯亮藍法蛋白定量。
注意事項：
1.低溫或長期保存，若發現 BCA 試劑 A或者試劑 B 有沉淀發生。請 37oC 溫育并伴隨攪拌促使其充分溶解。如發現細菌污染，則應丟棄，避免對實驗結果造成影響。
2．不受大部分樣品中的化學物質的影響，可以兼容樣品中 5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80 等。(詳情見附錄)
3 每次測量蛋白濃度均應做標準曲線。
4.當試劑 A和 B 混合時會有渾濁，混勻后就會消失。
5.需準備 37℃水浴或溫箱、酶標儀或普通分光光度計，測定波長為540-595nm 之間，562nm zuì佳。酶標儀需與 96 孔酶標板配套使用。使用分光光度計測定蛋白濃度時，試劑盒測定的樣品數量會因此而減少。使用溫箱孵育時，應注意防止因水分蒸發影響檢測結果。
6.使用 BCA 蛋白測定法測定時顏色會隨著時間的延長不斷加深，并且顯色反應的速度和溫度有關，因此需注意保持定時和定溫，以確保定量。
7.實驗操作規范，提高上樣量的度。
使用方法：
一．配制 BSA 標準品
注：標準品稀釋液為蛋白樣品的溶解液，原則上蛋白樣品在什么溶液中，標準品也宜用什么溶液稀釋。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS 進行稀釋。
二.配制 BCA 工作液
A.計算所需要的總 BCA 工作液體積。
總 BCA 工作液體積=(標準品+待測樣品)×重復數×每個樣品所需要的BCA 工作液
注意：試管法檢測時每個樣品加 2.0ml BCA 工作液，微孔板檢測每個樣品加 200μl BCA 工作液。
B.配制 BCA 工作液：50 體積的BCA 試劑 A 中加入 1 體積的BCA 試劑 B(A:B=50:1)，充分混勻。
注意：BCA 試劑 B 加入 BCA 試劑 A 中后，迅速渾濁，通過混勻后立即變澄清。BCA 工作液裝入密封容器內，室溫條件 24h 穩定。
三.試管法(樣品：BCA 工作液=1:20)
1.各取 100μl 標準品和待測樣品加入到反應管中。
2.每管加入 2.0ml BCA 工作液，混勻。37℃孵育30min。
注意：也可室溫孵育2h，或者 60℃孵育30min。BCA 檢測蛋白濃度，延長孵育時間會加深顏色反應。升高溫度會加快顯色反應。但是溫度升高和時間延長會降低檢測下限，以及降低工作線性范圍
3.冷卻到室溫。在分光光度計上進行檢測，設定波長為562nm。用裝滿水的比色皿對儀器校零。然后在 10分鐘內對所有樣品讀數。
注意：由于 BCA 反應達不到真正的反應終點，即使溫度降低至室溫生色反應液會繼續。但是，由于室溫下生色比率相當低，因此若是 10min 內能對所有的樣本進行 562nm 吸光度的測試，不會導致明顯錯誤。
4.根據 BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即zuì終的讀數)，繪制標準曲線(X-蛋白濃度 μg/ml；
Y-zuì終的OD562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。
四.微孔板法(樣品：BCA 工作液=1:8)
1.各取 25μl 標準品和待測樣品加入到微孔板中。
注意：樣品與工作液比例為1:8，若樣品有限，可使用 10μl 標準品和待檢測樣品進行檢測(即 1:20)，這時試劑盒的檢測范圍為125-2000μg/ml。
2.每孔加入 200μl BCA 工作液，振蕩 30s 充分混勻。蓋上微孔板，37℃孵育30min。
3.冷卻到室溫，在酶標儀上的540～595nm 波長范圍處檢測吸光度，其中 562nm 波長為zuì佳。
注意：延長孵育時間或者提高樣品：BCA 工作比會增高每個孔的OD562nm 凈值，并且降低檢測下限和工作線性范圍。
4.根據 BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即zuì終的讀數)，繪制標準曲線(X-蛋白濃度 μg/ml；
Y-zuì終的OD562nm)。依據標準曲線和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度

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