SY0256 高分辨率瓊脂糖

產品簡介
北京百奧萊博供應的高分辨率瓊脂糖用于科研試驗,本品質量穩定,價位合理,需要高分辨率瓊脂糖等核酸電泳和回收產品的客戶,請到我公司官網聯系我們。...
產品詳細介紹
特別提示:包括高分辨率瓊脂糖(PCR級)在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:高分辨率瓊脂糖(PCR級)
英文名稱:High Sieving Agarose
產品貨號:SY0256
產品規格:5g|25g|100g
瓊脂糖(Agarose)是純化的線性半乳聚糖親水膠體,提取自瓊脂或者含瓊脂的海藻,結構上是一種線性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)連接3,6-脫水α-L-吡喃半乳糖基構成。作為一種凝膠試劑,常用于通過凝膠電泳或者印跡法(如Northern或Southern)來進行日常核酸分析,也適用于蛋白應用,如輻射狀免疫擴散(RID)實驗。
本品為PCR級高分辨率瓊脂糖,對PCR產物、小片段DNA具有較高的分辨率,適宜分離20bp-800bp的DNA片段,其分離效果可與聚丙烯酰胺相媲美。此外,還具有如下特點:
1)易溶解,膠液更清澈,可以配制高達5%的凝膠;
2)很低的背景;
3)品質穩定等。
瓊脂糖的基本參數,包括:
1) 硫酸鹽含量(sulfate content)——純度指標,因為硫酸根是存在瓊脂糖內的主要離子基團;
2) 凝膠強度(gel strength)——施加于凝膠使之斷裂的外力;
3) 膠凝點(Gel point)——水溶性瓊脂糖溶液冷卻后形成凝膠時的溫度。液體向凝膠轉化的過程中,瓊脂糖溶液具有滯后性,因此,膠凝點不等同于膠熔點。
4) 電滲(EEO)——液體穿透凝膠的一種電動運動。瓊脂糖凝膠內的陰離子基團吸附在基質上不會發生遷移,但是解離的陽離子就會朝負遷移,從而產生電滲。由于生物聚合物的電泳遷移通常是朝負運動,則EEO產生的內部對流會干擾分離效率。
產品性質
| CAS: | 39346-81-1 |
| 外觀(Appearance) | 白色粉末 |
| 凝膠強度(Gel Strength) | ≥750g/cm2(1.5% gel) |
| 凝膠溫度(Gel Point) | ≤33℃(1.5% gel) |
| 融膠溫度(Melting Point) | ≤70℃(1.5% gel) |
| 電滲值(EEO, -mr) | ≤0.10 |
| 外觀(Appearance) | 無色清澈膠液 |
| 硫酸鹽(Sulfate, %) | ≤0.10% |
| 水分: | ≤10% |
| 灰分(Ash Content) | ≤0.5% |
| DNA酶(DNase) | Not detected |
| RNA酶(RNase) | Not detected |
| 蛋白酶(Protease) | Not detected |
| 核酸內切酶(Endonuclease) | Not detected |
使用方法
1)配制適量電泳及制膠用的緩沖液(根據電泳需要,配制合適濃度的電泳及制膠緩沖液),倒入合適三角瓶中。【注意】:用于電泳的緩沖液和用于制膠的緩沖液必須是相同的。
2)根據制膠量及凝膠濃度,加入準確稱量的瓊脂糖粉(總液體量不宜超過三角錐瓶的50%容量)。
3)在微波爐中加熱溶解瓊脂糖,設置中火加熱至沸騰,保持膠液沸騰約 30s,戴上防熱手套,移開三角錐瓶,小心搖動三角錐瓶,重懸未溶解顆粒,再次用高火加熱1分鐘(或加熱直至瓊脂糖完全溶解)。請戴上防熱手套,小心搖動三角錐瓶,使瓊脂糖膠液充分均勻。
【注意】:必須保證瓊脂糖充分完全溶解,此時瓊脂糖膠液清澈,否則,會造成電泳圖像模糊不清。加熱時如膠液劇烈沸騰發泡,停止加熱。微波爐中加熱時間不宜過長。
4)使溶液冷卻至60℃左右,如需要可在此時加入溴化乙錠(EB)溶液使其終濃度為0.5μg/ml,并充分混勻。
【注意】:溴化乙錠是一種致癌物質。使用含有溴化乙錠的溶液時,請戴用手套。建議使用我司提供的EB替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用時僅需用制膠緩沖液稀釋至1×工作液即可。
5)將瓊脂糖溶液倒入制膠模具中,在適當位置處插上梳子。凝膠厚度一般在3-5mm之間。
6)在室溫下使膠凝固(大約30min-1h),然后放置于電泳槽中進行電泳。
【注意】:凝膠不立即使用時,請用保鮮膜將凝膠包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5天。
瓊脂糖濃度與DNA分離范圍
| 線性DNA片段大小(bp) | 20-250 | 50-500 | 100-1200 | 500-2000 |
| 瓊脂糖濃度(%) | 5.0 | 4.0 | 3.0 | 2.0 |
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