北京百奧萊博供應(yīng)的MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑用于生化實驗研究等領(lǐng)域，我公司的MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
英文名稱：MTT Cell Proliferation Assay Kit
產(chǎn)品貨號：SY0506
產(chǎn)品規(guī)格：500T|1000T|5000T

本試劑盒以MTT（高純度）作為指示劑，在經(jīng)典操作步驟的基礎(chǔ)上，采用獨特的甲臜溶解液配方，可以直接溶解甲臜沉淀，無需去除原有的培養(yǎng)液。從而避免因去除培養(yǎng)液時甲臜被部分去除而引起的操作誤差。具有本底低，靈敏度高，線性范圍寬，操作簡單等特點。另外，本試劑盒還提供配套的一次性針頭過濾器和注射器，為實驗帶來更多的便利。

噻唑蘭（Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT），也稱作溴化噻唑藍(lán)四氮唑，是一種黃色染料，已經(jīng)普遍替代傳統(tǒng)的臺盼藍(lán)染色法或者放射性同位素插入法，用來檢測細(xì)胞的活力，細(xì)胞增殖以及細(xì)胞毒性分析。檢測原理在于：MTT是一種可接受氫離子的化合物染料，帶正電荷，具有細(xì)胞膜滲透性。活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能夠?qū)⑼庠催M(jìn)入的MTT還原成為水不溶性的深藍(lán)色MTT-甲臜結(jié)晶，而死細(xì)胞不具有此功能。甲臜結(jié)晶是不能穿透細(xì)胞膜，因此沉積在處于增殖且未受損傷的細(xì)胞內(nèi)。甲臜結(jié)晶可用DMSO或者酸化的異丙醇溶解出來，酶標(biāo)儀下測定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量與活細(xì)胞數(shù)目成正比，用以評估細(xì)胞存活狀況。

產(chǎn)品組份：
MTT粉末——————25mg
MTT溶劑——————5ml
甲臜溶解液————50ml
除菌套裝—————1包

注意事項
1)甲臜溶解液具有腐蝕性和毒性，使用時注意防護(hù)。
2)MTT有致癌性，應(yīng)小心操作；MTT溶液需要無菌，因其對菌很敏感。MTT溶液不可4℃保存超過1周，因其可能發(fā)生降解，導(dǎo)致檢測結(jié)果錯誤。
3)MTT法只能用來檢測細(xì)胞相對數(shù)和相對活力，但不能測定細(xì)胞數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測結(jié)果的時候，為了保證實驗結(jié)果的線性，MTT吸光度zuì好在0-0.7范圍內(nèi)。
4)使用微孔板進(jìn)行檢測，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間比較長，需要注意蒸發(fā)的問題。一般情況，由于96孔板周圍一圈zuì容易蒸發(fā)，建議棄用周圍一圈的方法，改加PBS，水或者細(xì)胞培養(yǎng)液等。也可通過將96孔板放在靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的位置，以減緩蒸發(fā)現(xiàn)象。
5)甲臜溶解液低溫或者常溫保存可能會產(chǎn)生沉淀，只需37℃水浴使其充分溶解，混勻后即可使用。
6)為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

儲存條件：4℃，有效期1年

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名稱：細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測試劑盒
貨號：YT129
規(guī)格：50次
本試劑盒是一種采用經(jīng)典的碘化丙啶染色方法進(jìn)行細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡分析的檢測試劑盒。本試劑盒足夠檢測50個樣品，每個樣品的細(xì)胞數(shù)量可以為10-100萬。

試劑盒組份：
染色緩沖液——————25ml
碘化丙啶染色液(20X)——————1.25ml
RNase A(50X)——————0.5ml

碘化丙啶(Propidium，簡稱PI)是一種雙鏈DNA的熒光染料。碘化丙啶和雙鏈DNA結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光，并且熒光強度和雙鏈DNA的含量成正比。細(xì)胞內(nèi)的DNA被碘化丙啶染色后，可以用流式細(xì)胞儀對細(xì)胞進(jìn)行DNA含量測定，然后根據(jù)DNA含量的分布情況，可以進(jìn)行細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡分析。

碘化丙啶染色后，假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強度為1，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強度的理論值為2，正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強度為1-2之間。凋亡細(xì)胞由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及發(fā)生DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片段在染色

細(xì)胞發(fā)生凋亡時，由于胞漿和染色質(zhì)濃縮、核碎裂，產(chǎn)生凋亡小體，使細(xì)胞的光散射性質(zhì)發(fā)生變化。在細(xì)胞凋亡的早期，細(xì)胞對前向角光散射的能力顯著降低，對側(cè)向光散射的能力增加或沒有變化。在細(xì)胞凋亡的晚期，前向和側(cè)向光散射的信號均降低。因此可通過流式細(xì)胞儀測定細(xì)胞光散射的變化觀察細(xì)胞凋亡情況。

本試劑盒通常應(yīng)用于培養(yǎng)的貼壁或懸浮細(xì)胞的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測。如果用于組織的細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測，則必須把組織消化成單細(xì)胞狀態(tài)，才可以進(jìn)行檢測。

注意事項：
1. 本試劑盒需使用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測。
2. 需自備PBS和70%乙醇，PBS。
3. 熒光染料均存在淬滅問題，保存和使用過程中請盡量注意避光，以減緩熒光淬滅。

儲存條件：-20℃避光，有效期一年。

名稱：一步法TUNEL細(xì)胞凋亡檢測試劑盒(綠色熒光)
貨號：YT135
規(guī)格：20次|50次
本試劑盒提供了一種高靈敏度又快速簡便的細(xì)胞凋亡檢測方法。對于經(jīng)過固定和洗滌的細(xì)胞或組織，只要經(jīng)過一步染色反應(yīng)，洗滌后就可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測到呈現(xiàn)綠色熒光的凋亡細(xì)胞。本試劑盒足夠檢測20個樣品。

試劑盒組份：
TdT酶——————————40μl
熒光標(biāo)記液————————960μl
TdT酶稀釋液(選用)————500μl

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時，會激活一些DNA內(nèi)切酶，這些內(nèi)切酶會切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時抽提DNA進(jìn)行電泳檢測，可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。基因組DNA斷裂時，暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase,TdT)的催化下加上綠色熒光探針熒光素(FITC)標(biāo)記的dUTP(fluorescein-dUTP)，從而可以通過熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測，這就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法檢測細(xì)胞凋亡的原理。注：FITC是fluorescein isothiocyanate的縮寫，實際上大多數(shù)情況下所謂的FITC即為fluorescein。

本試劑盒有如下優(yōu)點。
(1)高靈敏度：背景染色低，陽性染色明亮，可以在單細(xì)胞水平檢測到細(xì)胞凋亡，同時由于凋亡早期就有DNA斷裂，可以檢測到早期的細(xì)胞凋亡。
(2)特異性：TUNEL檢測時通常更容易標(biāo)記凋亡細(xì)胞，而不容易標(biāo)記壞死細(xì)胞。
(3)快速：僅需約1-2個小時即可完成。
(4)方便：只需一步染色反應(yīng)，洗滌后即可觀察，不必使用二抗等進(jìn)行多步操作。
(5)應(yīng)用范圍廣：可以用于檢測冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況，也可以檢測培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

TUNEL法特異性檢測細(xì)胞凋亡時產(chǎn)生的DNA斷裂，但不會檢測出射線等誘導(dǎo)的DNA斷裂(和細(xì)胞凋亡時的斷裂方式不同)。這樣一方面可以把凋亡和壞死區(qū)分開，另一方面也不會把射線等誘導(dǎo)發(fā)生DNA斷裂的非凋亡細(xì)胞判斷為凋亡細(xì)胞。

少數(shù)細(xì)胞凋亡時沒有DNA斷裂，此時不適用TUNEL法檢測。在個別類型的壞死細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)TUNEL檢測呈陽性。在需要嚴(yán)格判斷細(xì)胞凋亡的情況下，zuì好同時檢測多個凋亡指標(biāo)。

注意事項：
1. 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS或HBSS，用于封片的抗熒光淬滅封片液(YT097)，用于固定的4%多聚甲醛或向百奧萊博訂購免疫染色固定液(YT086)，同時需自備含0.1% Triton X-100的PBS或向百奧萊博訂購免疫染色洗滌液(YT089)。
2. 如果用于石蠟切片的檢測，需自備蛋白酶K，二甲苯。

儲存條件：-20℃。

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