北京百奧萊博供應的BtsIMutI限制性內切酶用于生化實驗研究等領域，BtsIMutI限制性內切酶是我司眾多優質工具酶之一，質量堪比同類進口產品，價格非常優惠，目前正熱烈促銷中，恭候您的咨詢訂購。...

特別提示：包括BtsIMutI限制性內切酶在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：BtsIMutI限制性內切酶
英文名稱：BtsIMutI Restriction Endonuclease
產品貨號：SV0286
產品規格：100U

在不同反應緩沖液的活性
BalbBuffer 1.1:
BalbBuffer 2.1: 50%
BalbBuffer 3.1: 10%
CutSmart Buffer:
特性
CutSmart、重組酶。
反應條件
CutSmart 緩沖液，55℃。
熱失活:80℃ 20 分鐘。
濃度
1,000units/ml。
37℃ 時活性
50%。
甲基化敏感性
對 dam、dcm 和哺乳動物 CpG 甲基化均不敏感。

根據您的關注的BtsIMutI限制性內切酶，您可能還對以下產品有需求：


BTN3160 RNase A溶液(10mg/mL) 1.5mL
YT392 M-MuLV反轉錄酶(逆轉錄酶) 2000U
YT411 DNase I 200U|1000U
SV0260 BstNI限制性內切酶 15KU|3KU|1500U
SV0263 BstUI限制性內切酶 5KU|1KU|500U
SV0289 ClaI限制性內切酶 5KU|1KU|500U
SV0768 XbaI限制性內切酶 15KU|15KU|3KU|3KU|1500U
SV0927 VentR DNA 聚合酶 1KU|200U|100U

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名稱：T4 DNA連接酶
貨號：WE0239
規格：100U|500U
  T4 DNA Ligase 是從表達T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經誘導表達后分離純化而來的，催化相鄰DNA鏈的5’磷酸基團和3’羥基基團以磷酸二酯鍵結合反應。該酶可催化平末端或粘性末端DNA之間的連接，還可修復雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交雙鏈中的單鏈切口。本品可應用于DNA插入片段和載體DNA的粘性末端和平末端的連接，以及線性DNA的自身環化。

產品組成：

組份	100U	500U
T4 DNA Ligase，5 U/μl	20μl	100μl
10×Ligation Buffer	150μl	750μl
50%PEG Solution	150μl	750μl

實驗前準備及重要注意事項
1、T4 DNA Ligase的zuì終用量不要超過推薦的用量，否則影響連接效率。
2、PEG可以大提高平末端的連接效率，我們推薦加入終濃度為5% PEG Solution以提高平末端的連接效率。
3、為了提高轉化效率，建議所加入連接產物的量不要超過感受態細胞體積的10%。
4、由于T4 DNA Ligase中含有甘油，比較粘稠容易掛壁，建議使用之前短暫離心將液體收集到管底，取樣時槍頭盡量不要深入液面太深以免粘在槍頭上造成損失。

使用方法：

一、粘性末端的連接：

1、按以下體系配制反應液：

組份	20μl體系	終濃度
線性載體DNA	Xμl	20-100ng
插入DNA片段	Yμl	插入片段：載體1:1-5:1
10×Ligation Buffer	2μl
T4 DNA Ligase，5 U/μl	0.2μl	1 U
ddH2O	補充至20μl

2、渦旋震蕩，瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底。
3、反應條件：22℃孵育10分鐘。
4、瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分鐘或70℃孵育5分鐘以滅活T4 DNA Ligase。
5、可取5μl連接產物熱擊轉化50μl感受態細胞或取1-2μl連接產物電擊轉化50μl感受態細胞。
注意：如需電擊轉化，推薦用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后進行電擊轉化。

二、平末端的連接：

1．反應體系：

組分	20μl體系	終濃度
線性載體DNA	Xμl	20-100ng
插入DNA片段	Yμl	插入片段：載體1:1-5:1
10×Ligation Buffer	2μl
T4 DNA Ligase，5 U/μl	1μl	5 U
50%PEG Solution	2μl	5%
ddH2O	補充至20μl	20μl

2、渦旋震蕩，瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底。
3、反應條件：22℃孵育1小時。
4、瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分鐘或70℃孵育5分鐘以滅活T4 DNA Ligase。
5、可取5μl連接產物熱擊轉化50μl感受態細胞或取1-2μl連接產物電擊轉化50μl感受態細胞。
注意：如需電擊轉化，推薦用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后進行電擊轉化。

三、線性DNA的自身環化：

1、反應體系：

組分	50μl體系	終濃度
線性載體DNA	Xμl	5-50ng
10×Ligation Buffer	5μl
T4 DNA Ligase，5 U/μl	1μl	5 U
ddH2O	補充至50μl	50μl

2、渦旋震蕩，瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底。
3、反應條件：粘性末端22℃孵育10分鐘；平末端22℃孵育1小時。
4、瞬間離心，將管壁上的溶液收集到管底，65℃孵育10分鐘或70℃孵育5分鐘以滅活T4 DNA Ligase。
5、可取5μl連接產物熱擊轉化50μl感受態細胞或取1-2μl連接產物電擊轉化50μl感受態細胞。
注意：如需電擊轉化，推薦用乙醇沉淀法去除T4 DNA Ligase后進行電擊轉化。

儲存條件：-20℃。

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