超純RNA提取試劑盒由專業試劑供應商北京百奧萊博提供，僅用于生物化學研究方面，我公司專注于RNA提取純化產品的研發、生產和供應，為您提供的超純RNA提取試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括超純RNA提取試劑盒在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：超純RNA提取試劑盒
英文名稱：SuperPure RNA Extraction Kit
產品貨號：WE0192
產品規格：50次|200次

  本試劑盒是基于TRIzon改進后的柱式總RNA提取試劑盒，裂解液充分裂解并勻質化樣本，采用獨特的硅基質膜吸附技術，通過離心吸附柱在高鹽狀態下專一的結合溶液中的RNA，同時zuì大限度的有效除去蛋白質、無機鹽離子及有機雜質等；可從動物組織、植物材料、各種微生物及培養細胞等樣品中快速提取總RNA，每次可處理 30-50 mg組織或5×106細胞，可同時處理多個不同樣品。本試劑盒提取得到的RNA可直接應用于RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、體外翻譯等實驗。

試劑盒組成：

組份	50次
TRIzon Reagent	60ml
Buffer RW1	40ml
Buffer RW2(濃縮液)	11ml
RNase-Free Water	10ml
吸附柱RM及收集管	50套
RNase-Free離心管(1.5ml)	50個

保存條件：TRIzon Reagent 2～8℃避光保存，其他組分室溫(15～30℃)。

自備試劑：lǜ仿(新開封或提取RNA專用)、70%乙醇(無RNase水配制)、無水乙醇。

產品特點：
1、純度高：zuì大限度除去蛋白質等雜質，提取的RNA可直接用于下游各種實驗。
2、提取量大：獨特的裂解液配方，充分裂解細胞或組織，RNA提取量多至100μg。
3、快速：步驟少，操作簡單，節省時間。
4、兼容性強：適用于多種動植物組織和細胞RNA的提取。

實驗前準備及重要注意事項：
1、預防RNase污染，應注意以下幾方面：
1)使用無RNase的塑料制品和槍頭，避免交叉污染。
2)玻璃器皿應在使用前于180℃高溫下干烤4小時，塑料器皿可在0.5 M的NaOH中浸泡10分鐘，用水徹底沖洗后高壓滅菌。
3)配制溶液應使用無RNase的水。
4)操作人員戴一次性口罩和手套，實驗過程中要勤換手套。
2、樣品應避免反復凍融，否則影響RNA提取得率和質量。
3、使用前若發現TRIzon Reagent有沉淀，可置于56℃水浴幾分鐘，即可溶解。
4、次使用前應按照試劑瓶標簽說明在Buffer RW2中加入無水乙醇。
5、所有離心步驟若無特殊說明均在室溫下進行，且所有操作步驟動作要迅速。
6、若下游實驗對DNA非常敏感，建議用不含RNase的DNase I(貨號：WE0213S)對RNA進行處理。

操作步驟：
1、樣品處理
①植物組織：取新鮮植物組織在液氮中充分研磨或將植物組織剪碎后直接在TRIzon Reagent中迅速研磨，每30-50 mg組織加入1ml TRIzon Reagent，混勻。
注意：樣品體積一般不要超過TRIzon Reagent體積的10%。
②動物組織：取新鮮或-70℃凍存的動物組織盡量剪碎，每30-50 mg組織加入1ml TRIzon Reagent，勻漿儀進行勻漿處理。或在液氮中研磨后加入TRIzon Reagent 1ml混勻。
注意：樣品體積一般不要超過TRIzon Reagent體積的10%。
③單層培養細胞：吸去培養液，可直接在培養板中加入適量TRIzon Reagent(每10cm2 面積需要1ml TRIzon Reagent)，用取樣器反復吹打使細胞裂解。也可用胰蛋白酶處理后，將細胞溶液轉移至RNase-Free的離心管中，300×g離心5 min，收集細胞沉淀，仔細吸除所有上清，加入TRIzon Reagent 1ml混勻。
注意：
1)收集細胞數量不要超過1×107。
2)TRIzon Reagent加量根據培養板面積決定，不是由細胞數決定。如果TRIzon Reagent加量不足，可能導致提取的RNA中有DNA污染。
3)收集細胞時一定要將細胞培養液去除干凈，否則會導致裂解不完全，造成RNA的產量降低。
④細胞懸液：離心收集細胞。每5×106-1×107動物、植物和酵母細胞或每107細菌細胞加入1ml TRIzon Reagent。
注意：
1)加入TRIzon Reagent前不要洗滌細胞，以免RNA降解。
2)一些酵母和細菌細胞可能需要勻漿儀或液氮研磨處理。
⑤血液處理：直接取新鮮的血液，加入3倍體積的TRIzon Reagent(推薦0.25ml全血加入0.75ml TRIzon Reagent)，充分振蕩混勻。
⑥可選步驟：對于蛋白、脂肪、多糖或胞外物質含量高的樣品，如肌肉組織、脂肪組織或植物的塊莖，可以在勻漿處理后4℃，12000rpm(~～13400×g)離心10分鐘以除去不溶物質，此時沉淀中含胞外物質、多糖和高分子量的DNA，而RNA存在于上清中。

2、樣品中加入TRIzon Reagent后反復吹打幾次，使樣本充分裂解。室溫放置5分鐘，使蛋白核酸復合物完全分離。
3、以每1ml TRIzon Reagent加入200μllǜ仿的比例加入lǜ仿，蓋好管蓋，劇烈振蕩15秒，室溫放置2分鐘。
4、4℃ 12000rpm(~～13400×g)離心10分鐘，此時樣品分為三層：紅色有機相，中間層和上層無色水相，RNA主要在上層水相中，將上層水相移到一個新的RNase-Free離心管(自備)中。
5、在得到的水相溶液中加入等體積的70%乙醇(無RNase水配制)，顛倒混勻。
6、將上步所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱中。若一次不能加完溶液，可分多次轉入。12000rpm離心20秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入700μl Buffer RW1，12000rpm離心20秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
8、向吸附柱中加入500μl Buffer RW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇)，12000rpm離心20秒，倒掉收集管中的廢液，將吸附柱重新放回收集管中。
9、重復步驟8。
10、12000rpm離心2 分鐘，倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘，徹底晾干。
注意：這一步目的是將吸附柱中殘余乙醇去除，乙醇殘留會影響后續酶促反應(酶切、PCR等)。
11、將吸附柱置于一個新的無RNase離心管中，向吸附柱的中間部位加入30-50μl RNase-Free Water，室溫放置1分鐘，12000rpm離心1分鐘，收集RNA溶液，-70℃保存RNA，防止降解。
注意：
1)RNase-Free Wate體積不應小于30μl，體積過小影響回收率。
2)如果要提高RNA的產量，可用30-50μl新的RNase-Free Water重復步驟11。
3)如果要提高RNA濃度，可將得到的溶液重新加入到吸附柱中，重復步驟11。

儲存條件：室溫(15～30℃)。

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貨號	名稱	規格
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BTN101118	水樣病毒沉淀劑	10次
BTN81220	昆蟲RNA柱式提取試劑盒	50次
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BTN90903	無RNase的DNase溶液	500U
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WE0203	DNA/RNA提取試劑盒	50次

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名稱：非凍型組織RNA保存液
貨號：BTN3060
規格：250mL
本RNA保存液是一種在較高溫度下保存RNA樣品的非凍型溶液，它能迅速滲入細胞內，通過抑制 RNase的活性而保存RNA的完整性。

產品特點：
1. 操作簡單，將組織剪薄浸沒在RNA保存液中即可使其RNA不被降解。
2. 替代液氮，使樣品的保存不需液氮，干冰或-80℃冰箱，尤其適用于臨床和野外樣品的快速和大規模采集。
3. RNA完整，因本產品能迅速抑制組織中RNA酶的活性，故從中提取的RNA的質量跟液氮保存的樣品相比不相上下。
4. 方便運輸，處理過的樣品能在 25℃保存一周，使樣品郵寄和運輸變得容易和，有利學術合作和交流。
5. 反復凍融，經本產品處理的樣品可反復凍融20次，其間可對樣品進行各種處理而不影響zuì終提取的RNA的質量。
6. 結果準確，本產品進入細胞十分快速，基因表達在發生應急改變前就得以鎖定，故RNA分析更能反映取樣時的真實情況。
7.可比性強，本產品能減少大規模樣品處理中的誤差，增加各次實驗數據間的可比性，對大規模基因表達譜的分析尤其有用。
8. 兼容性廣，雖然處理過的樣品可以使用動物RNA提取試劑盒和TRIzol等試劑提取其RNA，樣品還可直接用于組織切片，免疫學和流式細胞分析而不影響RNA提取的質量。

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期二年。

使用方法：

一：用本產品保存新鮮組織樣品
1. 估計完全浸沒樣品所需要本產品的體積(1g組織需10mL)。
2. 標記收集管并加入估計所需量的本產品。
3.以zuì快速度將樣品剪切成厚度小于0.5cm的碎塊。
注: 鼠肝、腎和脾等小器官樣品和沒有蠟質保護層的植物樣品可不需剪切而直接放入本產品中保存，有蠟質保護層的植物樣品需要先將蠟表皮破壞。
4. 將組織碎塊完全浸沒于收集管的本產品中。
5. 將收集管存放于溫度適當的地方，存放時間不能超過該溫度下的zuì長存放時間，如果要存放在-20℃或-80℃，需先將樣品在 4℃放置過夜后再轉移到zuì后的溫度。注：將樣品轉移到-20℃或-80℃前，需要倒棄保護液。常見存放溫度與其zuì長存放時間關系為如下：

保存溫度	時間及效果
37℃	一天(保存三天的樣品 RNA有部分降解)
18-25℃	一周(保存兩周的樣品 RNA有輕微降解)
2-8℃	一個月
-20℃和-80℃	長期

6.從存放處取出樣品(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)，用消過毒的鑷子將組織碎塊從保護液中取出。
7. 立即開始RNA提取或進行其他處理(如將樣品分割成更小的碎塊再重新保存等)。注:樣品可以反復凍融二十次而其 RNA 質量不會受到影響。

二：本產品保存培養細胞、懸浮細胞、細菌和RNA 病毒
1. 標記收集管。
2. 將待樣品轉移到離心管中，離心收集細胞，棄上清。注:處理含病毒的樣品(如血漿)可直接從步驟第4 步開始。
3. 用冰浴的緩沖液洗一次。
4. 將細胞懸浮在少量緩沖液中。
5. 加入五到十倍體積的本產品，混均; 對病毒樣品，加入兩到三倍體積的本產品，混均。
6. 將收集管存放于溫度適當的地方，存放時間不能超該溫度下的zuì長存放時間。
如果要存放在-20℃或-80℃，需先在4℃放置過夜后再轉移到zuì后溫度條件(將樣品轉移到-20℃或-80℃前，需要倒棄保護液)。注:樣品存放溫度與其zuì長存放時間關系為如下：

保存溫度	時間及效果
37℃	一天(保存三天的樣品 RNA 有部分降解)
18-25℃	一周(保存兩周的樣品 RNA 有輕微降解)
2-8℃	一個月
-20℃和-80℃	長期

7. 取出樣品，室溫下融化(-20℃或-80℃保存的樣品需先在室溫下融化)。
8. 加入一倍體積的預冷的緩沖液(如PBS)，用常規離心法收集細胞并用緩沖液洗一次。病毒樣品可免去此步驟。
9.細胞直接用于RNA的提取或其他處理。

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