柱式高純質粒小量提取試劑盒是高品質的DNA提取純化產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科研試驗，我公司專注于DNA提取純化產品的研發、生產和供應，為您提供的柱式高純質粒小量提取試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括柱式高純質粒小量提取試劑盒(不含內毒素)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：柱式高純質粒小量提取試劑盒(不含內毒素)
英文名稱：High purity plasmid free rapid extraction kit (centrifugal column type)
產品貨號：ALH081
產品規格：50次

本試劑盒采用改進SDS-堿裂解法裂解細胞，通過獨特的內毒素清除劑選擇性結合離心除去內毒素，然后離心吸附柱內的硅基質膜在高鹽、低pH值狀態下選擇性地結合溶液中的質粒DNA，再通過去蛋白液和漂洗液將雜質和其它細菌成分去除，zuì后低鹽、高pH值的洗脫緩沖液將純凈質粒DNA從硅基質膜上洗脫。

試劑盒組份(50次)：
平衡液—————————————5ml
RNaseA(10mg/ml)————————150μl
溶液P1—————————————15ml
溶液P2—————————————15ml
溶液N3—————————————15ml
內毒素清除劑——————————5ml
漂洗液WB————————————15ml
洗脫緩沖液EB——————————15ml
吸附柱和收集管(2ml)———————50套

試劑盒特點：
1.離心吸附柱內硅基質膜全部采用進口公司特制吸附膜，柱與柱之間吸附量差異小，可重復性好。克服了國產試劑盒膜質量不穩定的弊端。
2.獨特的去蛋白液配方，可以去除核酸酶。即使是核酸酶含量豐富的菌株如JM系列、HB101也可以輕松去除。有效防止了質粒被核酸酶降解。
3.獨特內毒素清除配方，清除內毒素效果一般小于＜0.1 EU/ug。
4.快速、方便， 不需要使用有毒的苯酚、氯fǎng等試劑，也不需要乙醇沉淀。獲得的質粒產量高、純度好，
5.直接可以用于轉染、酶切、轉化、PCR、體外轉錄、測序等各種分子生物學實驗。

注意事項
1. 所有的離心步驟均在室溫完成，使用轉速可以達到13,000rpm的傳統臺式離心機，如Eppendorf 5415C 或者類似離心機。
2. 提取質粒的量與細菌培養濃度、質粒拷貝數等因素有關。一般高拷貝質粒，建議接種單菌落于1.5-4.5 ml加合適抗生素的LB培養基， 過夜培養14-16個小時，可提取出多達20μg的純凈質粒。如果所提質粒為低拷貝質粒或大于10kb的大質粒，應適當加大菌體使用量，使用5-10 ml過夜培養物，同時按比例增加P1、P2、N3的用量，其它步驟相同。
3. 得到的質粒DNA可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。OD260值為1相當于大約50μg/ml DNA。電泳可能為單一條帶，也可能為2條或者多條DNA條帶，這主要是不同程度的超螺旋構象質粒泳動位置不一造成，與提取物培養時間長短、提取時操作劇烈程度等有關。本公司產品正常操作情況下基本超螺旋可以超過90%。
4. 質粒DNA確切分子大小， 必須酶切線性化后，對比DNA分子量Marker才可以知道。處于環狀或者超螺旋狀態的的質粒，泳動位置不確定，無法通過電泳知道其確切大小。
5. 洗脫液EB不含有螯合劑EDTA，不影響下游酶切、連接等反應。也可以使用水洗脫，但應該確保pH大于7.5，pH過低影響洗脫效率。用水洗脫質粒應該保存在－20℃。質粒DNA如果需要長期保存，可以用TE緩沖液洗脫（10mM Tris-HCl，1mMEDTA，pH 8.0），但是EDTA可能影響下游酶切反應，使用時可以適當稀釋。

儲存條件：室溫，有效期12個月。

本制品別名：無內毒素質粒提取試劑盒|高純度無內毒素質粒制備試劑盒

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