WB化學發光法檢測試劑盒是高品質的免疫檢測產品，由北京百奧萊博供應，本產品用于科研試驗，我公司專注于免疫檢測產品的研發、生產和供應，為您提供的WB化學發光法檢測試劑盒質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括WB化學發光法檢測試劑盒(人IgG)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：WB化學發光法檢測試劑盒(人IgG)
英文名稱：ECL Western Blotting Detection Kit(Human IgG)
產品貨號：QN2678
產品規格：1kit

SDS-PAGE電泳后，蛋白質按照分子量大小分離，轉移到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）后，固相載體以非共價鍵形式吸附蛋白質，以固相載體上的蛋白質或多肽作為抗原，與對應的抗體起免疫反應，再與酶標記的第二抗體起反應，加入發光底物后，能讓膠片感光。經顯影和定影后，可以在膠片上顯示出條帶（抗原所在位置）。

產品內容：
封閉試劑：30g(可配制400ml)。
10倍濃縮抗體稀釋液，50ml。
HRP標記二抗，0.3ml，效價1:500～1000。
ECL顯色液，25ml A液 + 25ml B液。
保存條件：-20℃避光密閉保存，有效期一年。若經常使用，可將封閉試劑，抗體稀釋液和ECL顯色液存放于 2-8℃以方便使用。

操作步驟(僅供參考)：
常規電泳轉膜后：
1．清洗轉印膜：將膜剝離下后，作好標記，一般在左上角剪一缺口。室溫用TBS-T漂洗3次每次5min,以盡量洗去轉印膜上的SDS，防止影響后面的抗體結合。
2．按5g封閉試劑加100ml雙蒸水計，配制膜封閉液，配好的膜封閉液為乳白色懸液，將漂洗過的轉印膜放入封閉液內，置搖床孵育，室溫封閉30min。用TBS-T緩沖液（pH7.6）洗膜，室溫漂洗3次每次5min。
3．將10×抗體稀釋液用雙蒸水稀釋成1×(10ml 10×抗體稀釋液加入90ml雙蒸水，混勻，可4℃保存三個月)。此稀釋液可作為一抗和二抗的稀釋液。
4．用1×的抗體稀釋液稀釋一抗。根據用量以及一抗的推薦稀釋濃度來稀釋一抗。將雜交膜放入雜交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育過夜或37℃搖動孵育2h。此用過的抗體一般可回收第二天再使用一次。
  注：如果所加一抗不同，可在此步將膜沿電泳方向剪成條，分別作好標記，分開孵育。
5．用TBS-T 緩沖液（PH7.6）洗膜，室溫漂洗3次每次5min。
6．用1×的抗體稀釋液稀釋二抗。根據用量，按10ml抗體稀釋液加入15μl HRP標記二抗的比例，配制二抗工作液。將雜交膜放入雜交袋中，加入二抗工作液，封口，37℃搖動孵育1h。此用過的抗體一般可回收第二天
再使用一次。
7．用TBS-T緩沖液（pH7.6）洗膜，室溫漂洗3次每次10min。
8．根據用量，取ECL發光液A、B等量混勻，加在膜正面，暗室顯色1～5分種。傾去顯色液，小心用紙吸去顯色液，在上面蓋一層平整的透明紙。再取出感光膠片，做好標記，輕輕的放在膜上，顯色30秒到1分鐘，取出膠片浸入顯影液中，觀察顯色情況，再放入定影液中1分鐘。根據條帶強弱，再次感光時可減短或者加長感光時間（從5秒到30分鐘）以期達到理想結果。

注意事項：
1．請根據一抗來源選擇試劑盒。
2．可以根據顯色結果來優化實驗反應時間。如背景過深，可延長膜封閉時間，加長zuì終漂洗次數與時間。如果條帶過弱，可增加抗體濃度，可延長抗體孵育時間或加長感光時間。
3．TBS-T（0.01M，PH7.6）配制方法：稱取NaCl 8.5g，Tris 1.21g，用800ml雙蒸水溶解，用鹽酸調pH到7.6，再加入0.5ml Tween-20，用雙蒸水 加至1000ml，混勻即可。（也可按照自己的配制習慣來配制）

根據您的關注的WB化學發光法檢測試劑盒(人IgG)，您可能還對以下產品有需求：

貨號	名稱	規格
YT069	Western洗滌液(10X)	100ml|10×100ml
YT095	甘油明膠封片液(Kaiser封片液)	10ml
YT371	辣根過氧化物酶標記鏈霉親和素	200μl
ZN1868	4%多聚甲醛溶液(不含DEPC)	500ml
ZN1902	硝酸纖維素薄膜(NC膜)0.22μm 9cm×10cm	20片
ZN1949	防脫片玻片(多聚賴氨酸處理)	50片
ZN1970	HE染色試劑盒	2×100ml

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名稱：BCIP/NBT堿性磷酸酯酶顯色試劑盒
貨號：YT078
規格：共100ml
本試劑盒是一種用于免疫組化顯色、Western等膜顯色和誘導多功能干細胞iPS鑒定等的試劑盒。

堿性磷酸酯酶常被稱作堿性磷酸酶(EC 3.1.3.1)，是一類水解酶，通過水解磷酸單酯將底物分子上的磷酸基團除去，并生成磷酸根離子和自由的羥基，其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白質和生物堿等，并在堿性條件下zuì為有效。該酶是一組同功酶的統稱。常見的小牛腸堿性磷酸酶被廣泛用于二抗等的標記zuì終用于蛋白和核酸等的檢測，也常用于DNA或RNA 5’和3’末端的去磷酸化(去單磷酸化)，特別是質粒的5’末端去磷酸化以避免質粒自連等。

BCIP/NBT是堿性磷酸酯酶的常用底物。在堿性磷酸酯酶的催化下，BCIP會被水解產生強反應性的產物，該產物會和NBT發生反應，形成不溶性的深藍色至藍紫色的NBT-formazan。

本試劑盒可以用于細胞或組織的堿性磷酸酯酶顯色包括誘導多功能干細胞iPS的鑒定，也可以用于Western等結合有堿性磷酸酯酶的膜的顯色檢測。同時也可以用于細胞或組織內源性的堿性磷酸酯酶顯色。

試劑盒組份：
堿性磷酸酯酶顯色緩沖液————100ml
BCIP溶液(300X)————————350μl
NBT溶液(150X) ————————700μl

儲存條件：4℃，有效期一年。

名稱：封閉液(用TBS配置，不含去垢劑)
貨號：YT874
規格：100ml
本品是zuì新一代的快速封閉液，總體效果顯著優于傳統的基于BSA(牛血清白蛋白)、脫脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封閉液及國外同類產品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等實驗中的封閉、一抗或二抗的稀釋。本產品配制在TBS中，不含去垢劑。 按照每張膜封閉需要5-10ml封閉液計算，一個包裝的本產品 可以封閉10-20張膜。

本封閉液快速。封閉時間通常僅需5-15分鐘，并且和BSA、脫脂奶粉、酪蛋白等傳統封閉液以及國外同類的快速 封閉液相比，顯示出更強的信噪比(參考下圖)。

本封閉液封閉后背景低。本封閉液不含血清和白蛋白，確保高的信噪比。

本封閉液兼容性好，兼容辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶和生物素標記的二抗。本產品中添加了不影響HRP和AP活性的防腐劑，不會干擾HRP或AP標記二抗的檢測。同時本產品不含生物素，不會干擾基于生物素的檢測。

本封閉液使用靈活。本產品配制在TBS中，可以直接用于相關實驗，但也可以根據實驗需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至終濃度為0.05%-0.1%后用于封閉、一抗或二抗的稀釋。

本產品與BSA及國外同類產品的封閉效果對比參見下圖。在相同樣品和實驗條件下，僅封閉液及封閉時間存在如下圖所示的差異時，我公司的本封閉液封閉后的整體背景明顯低于BSA封閉后的背景，而且目的條帶亮度明顯高于國外同類品牌產品。


每組實驗從左到右依次為：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa細胞裂解液。請注意對于抗體A，本封閉液比BSA和國外同類產品具有更低 的背景，并且和國外同類產品相比信號明顯更強。對于抗體B，本封閉液比BSA具有更低的背景，和國外同類產品相比信號明顯更強。實際實驗結果會因樣品、抗體、實驗條件等的不同而存在差異，圖中數據僅供參考。

注意事項：
1. 本產品推薦僅使用一次，重復使用可能會導致封閉效果下降。但對于一些信噪比很高的一抗，例如一些內參抗體，本封閉液可以重復使用2-3次。回收的封閉液請勿與未使用 過的封閉液混合。
2. 通常本產品用于PVDF膜及NC膜時的封閉時間為5-15分鐘。對于一些背景非常高的抗體，可以嘗試將封閉時間延長為30-60分鐘。此外，如有特殊需要，也 完全可以4℃封閉過夜。
3. 由于沒有任何一種封閉液是適用于所有實驗體系的，因此對于一些特殊的實驗，可能需要根據具體情況考慮使用其它更合適的封閉液。
4. 取放PVDF膜和NC膜應使用平頭鑷子，并僅輕輕夾取其邊角，操作過程須避免膜表面產生劃痕、折痕或壓痕等痕跡。
5. PVDF膜一經浸潤和活化，需一直保持濕潤，根據Western進行到的具體步驟可放置于western轉膜液或洗滌液等適當溶液中，否則可能會產生難以封閉的異 常背景。
6. 在背景較高的情況下，為進一步提高信噪比，本產品中可以自行添加Tween-20或Triton X-100至終濃度為0.05%-0.1%。

儲存條件：4℃，有效期一年。

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