北京百奧萊博供應(yīng)的Stbl2化學感受態(tài)細胞用于生化實驗研究等領(lǐng)域，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多Stbl2化學感受態(tài)細胞等克隆與表達產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括Stbl2化學感受態(tài)細胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：Stbl2化學感受態(tài)細胞
英文名稱：Stbl2 Chemically Competent Cell
產(chǎn)品貨號：MQ0011
產(chǎn)品規(guī)格：10×100μl/50×100μl

Stbl2菌株來源于JM109 E.coli strain，適合克隆不穩(wěn)定插入片段(正向重復序列，逆轉(zhuǎn)錄病毒序列等)；mcr A突變和mcr BC-hsdRMS-mrr deletion使該菌株更適于克隆甲基化的基因組序列；同時Stbl2也可用于慢病毒載體的構(gòu)建。
recA1和endA1的突變有利于克隆DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。不存在lacIqZΔM15，不可用于藍、白斑篩選。
Stbl2感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19檢測轉(zhuǎn)化效率可達109 cfu/μgDNA。
保存條件：-80℃
基因型：
F-mcrAΔ(mcrBC-hsdRMS-mrr)recA1 endA1lon gyrA96 thi supE44 relA1λ-Δ(lac-proAB)
操作說明：
1.Stbl2感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中)，加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入0.9 mL室溫S.O.C.培養(yǎng)基，使用其他培養(yǎng)基會降低轉(zhuǎn)化效率。
4.30℃，225 rpm復蘇90分鐘。(當質(zhì)粒中含有不穩(wěn)定片段時，30℃培養(yǎng)可降低錯誤重組的概率，若轉(zhuǎn)化control PUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃，225 rpm復蘇60分鐘。)
5.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的S.O.C.培養(yǎng)基上。
6.將平板倒置放于30℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。(若轉(zhuǎn)化control PUC19計算轉(zhuǎn)化效率，則需37℃培養(yǎng)過夜)
注意事項：
1.感受態(tài)細胞zuì好在冰上融化。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少zuì終用于涂板的菌量。

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