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產(chǎn)品名稱：小鼠淋巴細胞分離液
產(chǎn)品貨號：BTN120914
產(chǎn)品規(guī)格：200mL



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名稱：淋巴細胞分離液1.077
貨號：SY0532
規(guī)格：100ml|5×100ml
淋巴細胞分離液（Lymphocyte Separation Medium，簡稱LSM）是一種無菌的即用型分離液，基于B?yum的Ficoll-甲泛影鈉溶液做過一些改良，使得操作簡單快速且分離效率更高。每100 ml淋巴細胞分離液中含有6.2 g 聚蔗糖（Ficoll）和9.4 g 泛影酸鈉，20℃下的密度為1.0770-1.0800 g/ml。不僅適用于外周血淋巴細胞，也可分離其他組織來源的淋巴細胞，包括臍帶血和骨髓細胞。

工作原理
去纖維蛋白或肝素化人血以1：1的比例用生理鹽水或平衡鹽溶液稀釋，加在分離液上層，之后低速離心30 min。在離心過程中，差速遷移使其zuì終形成幾個細胞分層。聚集在管底的顆粒主要是紅細胞和多形核粒細胞，通過梯度遷移至管底。根據(jù)其密度的大小，淋巴細胞和其他單個核細胞如單核細胞，以及血小板分布在血漿和LSM兩層之間。淋巴細胞可以通過吸取分界層溶液回收，并通過進一步清洗來去除血小板，LSM和血漿。

操作方法
注：此操作流程適用于去纖維蛋白或抗凝血劑處理過的人血。對于其他物種或者其他組織的血液，可能需要對此步驟做出一定的改進。



1）輕輕顛倒瓶子使LSM充分混合；
2）無菌條件轉(zhuǎn)移3 ml LSM到15 ml離心管中；
3）用2 ml 生理鹽水混合2 ml去纖維蛋白血液或肝素化血液；
4）小心將稀釋血液加入3 ml LSM（室溫即可）的上層，使得在血液和LSM間形成一個明顯的分層。不要將稀釋血液混入LSM中；
5）室溫下400g離心15-30min，離心可以沉淀紅細胞和多形核白細胞，同時可以在LSM上形成一層單核-淋巴細胞分層，如下圖所示（從上到下，依次分為血漿層-淋巴細胞層-LSM層-RBC顆粒）；
6）吸出淋巴細胞層上方2-3 mm內(nèi)的血漿；
7）吸取淋巴細胞層以及它下面一半的LSM層，并轉(zhuǎn)移到另外一個離心管。加入等體積的平衡鹽緩沖液至離心管內(nèi)的淋巴細胞層中，室溫離心10 min，離心速度設(shè)定在既不損傷細胞又能沉淀細胞的范圍，例如160 – 260 g（清洗去除LSM和降低血小板含量）；
8）用平衡鹽緩沖液再清洗細胞一次，zuì后取適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基重懸細胞。

注意事項
1）稀釋去纖維蛋白血液或肝素化血液用的生理鹽水為無菌液體。
2）為保持淋巴細胞的活性，應(yīng)該采血后盡快進行分離。分離細胞層實際上是單個核細胞層，包括淋巴細胞和單核細胞。
3）若溶液變渾濁，呈現(xiàn)出不同的黃色或可能有受污染跡象，不可再使用。
4）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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SY0538 膠原酶IV型 100mg
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HR8174 兔淋巴細胞分離液 100ml
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