LAMP試劑盒(含染料)是高品質的核酸擴增(PCR)產品，由北京百奧萊博供應，本產品僅用于生物化學研究方面，本品質量穩定，價位合理，需要LAMP試劑盒(含染料)等核酸擴增(PCR)產品的客戶，請到我公司官網聯系我們。...

特別提示：包括LAMP試劑盒(含染料)在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：LAMP試劑盒(含染料)
英文名稱：Loop-mediated isothermal amplification Kit(With visible light dye)
產品貨號：MT0030
產品規格：50T|200T

LAMP(環介導等溫擴增技術)是一種核酸擴增技術，采用4或6條能夠識別目的基因上的6個特異區域的引物，依賴于Bst DNA聚合酶的強鏈置換活性，在30～60分鐘內DNA擴增可達10⁹～10¹⁰倍。本試劑盒含有可見光染料，陽性擴增樣品的顏色為天藍色，陰性擴增為紫羅蘭色。購買本試劑盒，我們可以為客戶設計引物，需要設計引物的請發Email咨詢。

產品特點：
1．檢測方便：變色反應，顏色變化明顯，肉眼即可觀察。
2．操作簡單：一步反應30分鐘即可完成。
3．特異性高：六條特異性引物，保證了產物的特異性和檢測的可靠性。
4．儀器簡單：只需維持恒溫的水浴鍋。
5．靈敏度高：能從低拷貝中擴增靶基因。
6．應用廣泛：廣泛適用于微生物致病菌檢測和疫病檢測。

產品組成：

組分	50T	200T
10×可見光染料	150μl	1ml
10×LAMP Buffer	1ml	1ml
100 mM MgSO4	500μl	500μl
10 mM dNTP Mixture	500μl	1ml
Bst DNA Polymerase 2.0	50μl	200μl

注意：10×LAMP Buffer中的Mg2+濃度為60 mM。

保存條件：-20℃，避免反復凍融，有效期3年。

反應實例：

應用本試劑盒和6條引物擴增HHV-6 DNA，產物分別可見光染料顯色觀察和電泳法檢測

使用方法：
1．按以下組分配置反應混合液：

加入物	加入量
10×LAMP Buffer	2.5μl
10×可見光染料	2.5μl
10mM dNTP Mixture	2μl
模板 DNA	Xμl
*10×LAMP Primer Mix	2.5μl
Bst DNA Polymerase 2.0	1μl
ddH2O	Up to 25μl

*10×LAMP Primer Mix：FIP/BIP 16μM each，Loop F/R 8μM each，F3/B3 2μM each
2．反應體系配好后，充分混勻并短暫離心，65℃ 30分鐘。

注意事項：
1．為了減少交叉污染，請分區操作（試劑和模板DNA的配置操作zuì好在不同區域中進行）。
2．實驗時，所需模板量取決與樣品類型（0.1ng～100ng），可行預實驗確定模板量。
3．10×LAMP Buffer中含有60 mM MgSO4，反應體系中Mg2+終濃度為6 mM。通常無需添加即可，必要情況下可提高到10～16mM。
4．各區物品均為專用，不可交叉使用，防止污染。
5．實驗過程中應穿工作服，帶手套，建議使用帶濾芯的一次性吸頭。


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BTN131212 PCR Mix染料 10mL
BTN130815 taq酶抗體 500U
BTN130911 miRNA cDNA鏈合成試劑盒 25次
YT378 2×PCR Master Mix（含Taq酶，buffer，dNTP） 400次
RFT105 Oligo(dT)18 Primer 100μl
SY0029 2×PCR Plus Master Mix(不含染料) 5×1ml
JN0041 2×Ultra Taq PCR MasterMix 0.5ml×5

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名稱：cDNA鏈合成試劑盒(逆轉錄試劑盒)(RT試劑盒)
貨號：BTN60906
規格：50次
本試劑盒提供合成cDNA鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)合成mRNA的全長cDNA拷貝。

產品特點：
1. 使用突變的反轉錄酶，內源RNase H活性低。
2. zuì長可合成13Kb的cDNA。
3.可以使用oligo-dT、隨機引物和RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提供)。
4. 總RNA、poly(A)+RNA或特殊RNA 均可作為模板。
5.可用于cDNA文庫構建、RT-PCR、探針標記等。

試劑盒組成：

成分	規格
MMLV(含RI)	100μl
RT Buffer(含dNTP)	300μl
Oligo(dT)18引物(0.5μg/μL)	50μl
Random Primer(0.2μg/μL)	50μl
RNase-free水	1ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：合成PCR用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反應體系：

RNA 模板
總RNA	100-500ng
或poly(A)mRNA	10-500ng
或專一的RNA	0.01pg-500ng
注意：RNA樣品不能含有基因組DNA污染。

引物

Oligo(dT)18(0.5μg/μL)	1μl
或隨機引物(0.2μg/μL)	1μl
或RNA 模板專一性引物	15-20 pmol
注意：隨機引物與RNA 模板的比例跟cDNA 合成的平均長度成反比。
RNase-free水	補水到13μL

2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保溫5分鐘。對富含二級結構的高GC RNA 模板，可以改成45℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則改成25℃ 5分鐘。
5. 加入2μL MMLV逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。此步為RT反應。
7. 70℃保溫10分鐘以終止反應，然后放置在冰上待用。合成的cDNA可以直接作為PCR 模板使用，不需要純化。

二：合成建文庫用的1st-strand cDNA
1. 按下表配制RT反應體系:

RNA模板
poly(A)mRNA	1μg
或專一的RNA	0.5-1μg
注意：RNA樣品不能含有基因組DNA污染。
引物
Oligo(dT)18(0.5μg/μL)	1μl
或隨機引物(0.2μg/μL)	1μl
或RNA模板專一性引物	100 pmol
注意：隨機引物于RNA模板的比例跟cDNA合成的平均長度成反比。
RNase-free水	補水到13μL

2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μl RT Buffer(含dNTP)。
4. 37℃保溫5分鐘。對富含二級結構的高GC RNA模板，可以改成45℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則改成25℃ 5分鐘)。
5. 加入2μl MMLV逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。此步為RT反應。
7. 70℃保溫10分鐘以終止反應，放置在冰上待用。合成的cDNA可以用于第二鏈cDNA的合成或放置在-20℃長期保存。

三：用對照模板合成cDNA(需要用同位素，需要對照的客戶需要單獨跟我司聯系)
1. 按下表配制RT反應體系:

對照RNA模板(0.5μg/μL)	2μl 引物
Oligo(dT)18(0.5μg/μL)	1μl
或隨機引物(0.2μg/μL)	1μl
或對照專用引物	2μl
RNase-free水	補水到13μl

2. 70℃保溫5分鐘后立即冰浴。
3. 再加入5μL RT Buffer(含標記dNTP，本試劑不提供)。
4. 37℃保溫5分鐘。如果使用隨機引物，則保溫溫度只能是25℃。
5. 加入2μL MMLV 逆轉錄酶(含RI)，反應終體積為20μL。
6. 42℃保溫60分鐘(但如果使用隨機引物，需要先25℃保溫10分鐘，然后再轉移到42℃保溫60分鐘)。
7. 加1μL 0.5M EDTA，放置在冰上待用。
8.電泳檢測。合成的cDNA的量一般有加入RNA總量的50%以上，電泳一般能出現1.1Kb的片段(如果使用隨機引物，將出現多個小片段)。

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