我公司致力于為客戶提供高純度、低成本的活性重組蛋白，包括兩步法RT-PCR試劑盒在內(nèi)的各類受體、細胞因子、生長因子、轉(zhuǎn)錄因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...

特別提示：包括兩步法RT-PCR試劑盒在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：兩步法RT-PCR試劑盒
英文名稱：Balbscript Two-Step RT-PCR UltraMix
產(chǎn)品貨號：JN0007
產(chǎn)品規(guī)格：RT(50次)&PCR(200次)

  本試劑盒基于本公司生產(chǎn)的Balbscript Reverse Transcriptase反轉(zhuǎn)錄酶（百奧萊博貨號：JN0011）和HotStart Taq DNA聚合酶（百奧萊博貨號：JN0023），具有的合成能力和高擴增效率。該試劑盒能以動物、植物和微生物的總RNA或mRNA為模板，用2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix進行反轉(zhuǎn)錄，2×HotStart Taq PCR MasterMix進行擴增。本試劑盒含有從RNA反轉(zhuǎn)錄至cDNA并以cDNA為模板進行擴增的全部試劑。

產(chǎn)品特點：
1、反轉(zhuǎn)錄反應操作簡單，通過減少實驗步驟降低了污染幾率。
2、使用HotStart Taq酶進行擴增，減少非特異性反應。

試劑盒組成：

組份	JN0007-50次
2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix	500ul
2×HotStart Taq PCR MasterMix	1ml×2支
RNase Free Water	1ml

操作方法：

鏈cDNA合成：
1、融化后，將試劑盒中各組分混勻并稍微離心后置于冰上。
2、按順序加入下面的反應物

模板RNA	總RNA(0.1 ng -5μg) poly(A) mRNA(10 pg) 特異性RNA(0.01 pg)
2×Balbscript PreMix 1st Strand cDNA Synthesis UltraMix	10μl
RNase Free Water	至20μl

3、可選優(yōu)化步驟。如果RNA模板GC含量高或者含有二級結(jié)構(gòu)，可先將RNA模板和RNase Free Water混勻后，65℃孵育5分鐘，冰上冷卻后再加入其它組分。
4、輕柔混勻后離心，于42℃條件下孵育60分鐘。 如果RNA模板中不含poly A結(jié)構(gòu)，可先在25℃條件下孵育5分鐘，隨后轉(zhuǎn)到42℃條件下孵育60分鐘。
5、70℃加熱5min終止反應。
反應產(chǎn)物可直接用于PCR反應，如果不立即使用，在-20℃可保存一周左右。如想延長保存時間，建議使用-70℃保存。

鏈cDNA的PCR擴增：
合成的鏈cDNA可直接用于PCR或qPCR。鏈cDNA反應液體積不能超過PCR反應體系的1/10。通常50 μl的PCR反應體系中，鏈cDNA反應液加入2μl。

常用反應體系（20μl）：

2×HotStart Taq PCR MasterMix	10μl
上游引物	0.2-1.0μM（終濃度）
下游引物	0.2-1.0μM（終濃度）
模板	1μl
Taq
ddH2O	至20μl

儲存條件：-20℃

根據(jù)您的關(guān)注的兩步法RT-PCR試劑盒，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：



名稱：25mM氯化錳溶液(PCR級MnCl2溶液)
貨號：BTN130307
規(guī)格：5mL
本產(chǎn)品為專門用于易錯PCR的MnCl2水溶液，濃度為25mM，可用于調(diào)節(jié)MnCl2的zuì佳濃度。由于Mg2+在PCR過程中可以穩(wěn)定非互補的堿基對，Mn2+能夠降低聚合酶對模板的特異性，因而調(diào)整兩種離子的濃度，可獲得不同突變頻率的多樣性文庫。

氯化錳分子量為125.8，CAS號為7773-01-5，水合氯化錳外觀為玫瑰色單斜晶體；無水氯化錳外觀為桃紅色結(jié)晶。密度為2.977g/cm3。熔點是650℃。在高于熔點溫度下升華。沸點1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。

儲存條件：低溫運輸、-20℃保存，有效期一年。

名稱：石蠟油，PCR級
貨號：BTN130841
規(guī)格：10mL
本產(chǎn)品是PCR級石蠟油試劑，專門用于PCR擴增、WGA擴增等實驗時添加到反應體系中，封閉反應成分，防止溶液的揮發(fā)。

儲存條件：常溫運輸及保存，有效期一年。

名稱：免RNA提取RT-PCR試劑盒(細胞組織裂解物RT-PCR試劑盒)
貨號：BTN130957
規(guī)格：100次
本產(chǎn)品是一種免RNA提取的RT-PCR的試劑盒，它使用精心優(yōu)化的細胞裂解液直接裂解培養(yǎng)細胞和痕量組織塊，然后直接在細胞裂解液中進行RT，再用cDNA進行PCR或熒光定量PCR。

產(chǎn)品特點：
1. 免RNA提取，從細胞裂解到得到RT-PCR或real-time RT-PCR結(jié)果只需3個步驟約3小時，省略了整個RNA提取過程。
2. 靈敏度不低于常規(guī)方法(先提總RNA再進行RT-PCR)，不但可以檢測到低拷貝的RNA，還可用于檢測miRNA。
3. 整合了去除基因組DNA的步驟，只檢測RNA，無需擔心基因組DNA的污染。
4. 每次只需要10-10000個培養(yǎng)細胞或含相應細胞數(shù)的痕量組織(如LCM樣品)，驗證過的細胞包括Hela、CHO、293、COS-7等，但不能用于U937細胞系。
5. 兩步法RT-PCR，后續(xù)使用靈活。得到的cDNA既可用于普通PCR，也可用于基于SYBR的熒光定量PCR，也可用于其他定量PCR(如TaqMan)，非常靈活。
6. 有單管操作和多孔板操作兩種模式，前者適用于少量樣品，后者適用于平行處理大量樣品，適用于高通量篩查。
7. 本產(chǎn)品足夠100次50μL體系的RT反應和600次30μL體系的PCR反應。

試劑盒組成：

成份	規(guī)格
細胞裂解液成分一	3.8mL
細胞裂解液成分二	300μL
細胞裂解液成分三	100μL
Oligo(dT),0.5ug/uL	50μL
隨機引物,0.2ug/uL	50μL
MMLV逆轉(zhuǎn)錄酶(含RI)	300μL
PCR MagicMix3.0	9mL
RNase-free 水	10mL
使用手冊	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

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貨號	名稱	規(guī)格
YT372	Pfu DNA聚合酶(Pfu酶)(含buffer)	200U|1000U
YT376	PCR Buffer套裝(用于PCR優(yōu)化)	5ml
YT383	PCR Master Mix (含綠色電泳染料)	400次|2000次10000次
WE0124	多重PCR Mix	1ml|5ml
WE0129	一步法RT-PCR試劑盒	100次
ALH203	動物組織細胞免DNA提取PCR試劑盒	100次|500次

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