0化學感受態(tài)細胞由北京百奧萊博供貨并提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)支持，本品僅用于生物化學研究方面，我公司的0化學感受態(tài)細胞品質(zhì)上佳，經(jīng)過多年的開發(fā)生產(chǎn)，已然非常成熟，歡迎廣大新老客戶訂購。...

特別提示：包括0化學感受態(tài)細胞在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：0化學感受態(tài)細胞
英文名稱：0?Chemically Competent Cell
產(chǎn)品貨號：MQ0002
產(chǎn)品規(guī)格：20×100μl/100×100μl

0菌株來源于MC1061菌株，是目前實驗室zuì常用的感受態(tài)細胞之一，基因型與DH10B高度類似(DH10B為galE15型，而0為galU型)。
0生長速度快(比DH5α快，但比Mach1-T1生長速度慢)，10小時可見克隆，recA1和endA1的突變有利于插入DNA的穩(wěn)定和高純度質(zhì)粒DNA的提取。
可用于構(gòu)建克隆，藍白斑篩選等實驗，具有鏈霉素抗性。0感受態(tài)細胞經(jīng)特殊工藝制作，經(jīng)pUC19質(zhì)粒檢測轉(zhuǎn)化效率>108cfu/μg。
保存條件：-80℃
基因型：
F-mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC)φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galU galK rpsL(StrR)endA1 nupG
操作說明：
1.0感受態(tài)細胞放置冰中融化(或放手心或室溫片刻，待菌體處于冰水混合狀態(tài)時迅速插入冰中)，加入目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)并用手撥打EP管底輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少13h。
注意事項：
1.感受態(tài)細胞zuì好在冰上融化。
2.混入質(zhì)粒或連接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3.轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)粒或率的連接產(chǎn)物可相應(yīng)減少zuì終用于涂板的菌量。

根據(jù)您的關(guān)注的0化學感受態(tài)細胞，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN140430	pression/BTN140430.html" target="_blank">大腸桿菌OmniMAX2-T1 Phage Resistant化學感受態(tài)細胞	0.1mL*10
BTN80910	pression/BTN80910.html" target="_blank">X-gal溶液	10mL
BTN60207	pression/BTN60207.html" target="_blank">氯霉素溶液	10mL
BTN120685	pression/BTN120685.html" target="_blank">先鋒霉素溶液	1mL
YT442	pression/YT442.html" target="_blank">pGL6報告基因質(zhì)粒	1μg
ALH351	pression/ALH351.html" target="_blank">通用型T載體克隆菌落PCR檢測試劑盒	80次|400次
SY0023	pression/SY0023.html" target="_blank">pCMV/myc/mito 線粒體定位表達載體(哺乳動物細胞)	1μg

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名稱：平末端DNA加A試劑盒
貨號：BTN60105
規(guī)格：50次
本產(chǎn)品利用Taq DNA polymerase的不依賴于模板的末端轉(zhuǎn)移酶活性，在只有dATP 存在的情況下，在平末端的DNA片段加上一個dA 尾巴，使平末端片段也能被T載體克隆。其流程圖如下：


產(chǎn)品特點：
1. 簡單，2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要單獨準備。
2.適用于任何平末端的DNA片段，包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.產(chǎn)物可以直接用于與T載體的連接。

試劑盒組成：

成分	規(guī)格
Taq DNA polymerase(5U/μL)	50μl
2×Tailing Buffer	1.25ml
說明書	1份

儲存條件：低溫運輸，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：

一：反應(yīng)前純化處理：
用Vent，Deep Vent，Pfu，Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶擴增得到的DNA片段，必須經(jīng)過徹底的去除殘留的酶的處理過程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K處理)，否則它們將在加A反應(yīng)時，切除掉加上的A尾巴，干擾反應(yīng)。可以采取膠回收和酚/氯fǎng抽提法等常規(guī)方法純化，zuì后溶解在水或TE中，終濃度以0.1μg/μL為宜。
二：加A反應(yīng)
在干凈的0.5mL或1.5mL離心管中，分別加入下列成分：

回收的DNA片段	0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer	25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL)	1μL
補水到	50μL
72℃保溫2小時

三：反應(yīng)后處理
加A反應(yīng)后，Taq DNA pol

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