BL21 由北京百奧萊博供貨并提供相關技術服務支持，本品用于科研試驗，我公司專注于克隆與表達產品的研發、生產和供應，為您提供的BL21 質量可靠，批間差小，且價格公道，熱切盼望您選購我們的產品。...

特別提示：包括BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞在內，本公司的所有產品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途！

產品名稱：BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞
英文名稱：BL21 (DE3) pLysS Chemically Competent Cell
產品貨號：SY0015
產品規格：100μl×10管

本品適合毒性蛋白和非毒性蛋白的表達。使用pUC19質粒檢測，本品轉化效率可達10^7BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞是大腸桿菌BL21(DE3)pLysS經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的熱擊轉化。該菌株攜帶pLysS質粒，具有氯霉素抗性（Camr），PLysS含有表達T7溶菌酶的基因，能夠降低目的基因的背景表達水平，但不干擾目的蛋白的表達。


基因型：F- ompT hsdSB(rB - mB -) gal dcm(DE3)pLysS Camr。
儲存條件：-80℃
組份：
BL21 (DE3) pLysS化學感受態細胞 100μl×10
pUC19（0.1 ng/μl） 5μl


注意事項

1）感受態細胞冰水浴中解凍后應立即使用。
2）待轉化DNA加入體積不要超過感受態細胞體積的1/10。
3）待轉化DNA加入感受態細胞后，請勿用移液槍吹打，輕輕彈勻即可。
4）為確保zuì率轉化，整個操作過程應盡量輕柔，并保持低溫。
5）本品應于-80℃保存，請勿將感受態細胞儲存于-20℃或液氮中保存。
6）為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

使用方法

1）將感受態細胞從-80℃中取出，置于冰水浴中融化。
2）將待轉化DNA加入到100 μl感受態細胞中，輕輕彈勻，冰上孵育30分鐘。
3）42℃水浴，不要晃動，準確熱激90s后，立刻置于冰水浴中，靜置2-3分鐘。
4）向離心管中加入900 μl LB或SOC培養基，37℃水浴鍋中靜置10分鐘。
5）150 rpm, 37℃振蕩培養45分鐘，使菌體復蘇，抗性基因表達。
6）2,500 g離心5分鐘，去掉900 μl上清。用剩余培養基將菌體重懸，用無菌涂布棒在含有正確抗性的平板上輕輕涂勻。室溫正置10分鐘。待菌液被平板吸收后，37℃倒置培養過夜。
【注】：也可直接吸取100-200 μl孵育后的菌液涂板。剩余菌液可在4℃保存，一周之內都可重新涂板。

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名稱：單細胞懸浮液
貨號：BTN130805
規格：1mL
本產品是單細胞懸浮溶液，本產品與后續各種單細胞分析實驗、單細胞擴增實驗兼容。

儲存條件：低溫運輸，4℃保存，有效期一年。

名稱：大腸桿菌BL21 Star(DE3)化學感受態細胞
貨號：BTN150801
規格：10*100μL
 BL21 Star(DE3)感受態細胞來源于BL21(DE3)菌株，由特殊工藝制作，使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達10cfu/μg。
 BL21 Star(DE3)菌株的特點是含有rne131基因突變體。rne131突變基因能夠增強菌株細胞內mRNA的穩定性，從而有效提高蛋白表達能力。本產品主要適用于T7啟動子表達載體(如pET 系列)的高水平蛋白表達。
 菌株基因型為：F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、LB培養基等。

使用方法：
1.從-80℃冰箱中取出感受態細胞，置于冰上解凍。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以100μL感受態細胞為例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受態細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。
3. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
4. 向離心管中加入700μL不含抗生素的無菌培養基(LB)，混勻后37℃，200rpm 復蘇60分鐘。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相應抗生素的LB培養基上。如果轉化高濃度的質粒，可以減少涂布的量。
6. 將平板倒置放于37℃培養箱過夜培養。

名稱：大腸桿菌JM110化學感受態細胞
貨號：BTN130511
規格：10*100μl
 本產品是采用大腸桿菌JM110菌株經特殊工藝處理得到的感受態細胞，可用于DNA的化學轉化。使用pUC19質粒檢測本產品，轉化效率可達106。本產品為dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影響。
 菌株基因型為：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

儲存條件：干冰運輸、-80℃保存，有效期半年。

自備試劑：目的DNA、SOC或LB培養基等。

使用方法：
1. 取感受態細胞置于冰浴中。一次轉化感受態細胞的建議用量為50-100μL，根據實際情況分裝使用。
以下實驗以50μL感受態細胞為例。
2. 待感受態細胞融化后，向感受態細胞懸液中加入目的DNA(根據實際情況加入適量的DNA，通常100μl感受態細胞能夠被1 ng超螺旋質粒DNA 所飽和)，用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3. 42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘。
4. 每個離心管中加入450μl 無菌的SOC或LB培養基(不含抗生素)，混勻后置于37℃搖床，150rpm 振蕩培養45分鐘使菌體復蘇。
5. 根據實驗需求，取適量已轉化的感受態細胞，加到含相應抗生素的SOC或LB 固體瓊脂培養基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養，37℃培養12-16小時。

注意事項：
1. 涂布用量可根據具體實驗調整。若轉化的DNA 總量較多，可取少量轉化產物涂布平板；若轉化的DNA 總量較少，可取200-300μl轉化產物涂布平板。若預計的克隆數較少，可通過離心(4,000rpm，2分鐘)后吸除部分培養液，懸浮菌體后將其涂布于平板中。
2. 新制備的固體培養基不易涂干，可將平板正置于37℃直至液體被吸收后再倒置培養。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的轉化菌落數過少，可以將剩下的菌液再涂布新培養基進行培養。

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