BaldStar TaqMan 的品牌是百奧萊博，是優(yōu)質(zhì)的核酸擴增(PCR)產(chǎn)品，本制品僅用于生物化學(xué)研究方面，本產(chǎn)品質(zhì)量好，且具價格，深為用戶稱道，了解更多BaldStar TaqMan 等核酸擴增(PCR)產(chǎn)品請聯(lián)系我司咨詢訂購。...

特別提示：包括BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)在內(nèi)，本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！

產(chǎn)品名稱：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)
英文名稱：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)
產(chǎn)品貨號：WE0154
產(chǎn)品規(guī)格：1ml|5ml

  本品是專用于探針法(TaqMan，Molecular Beacon等)實時熒光定量PCR的預(yù)混體系，濃度為2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作簡單方便。主要用于基因組DNA靶序列和RNA反轉(zhuǎn)錄后的cDNA靶序列的檢測，如基因表達分析，拷貝數(shù)分析，SNP基因型分析等。本產(chǎn)品中運用了dUTP-UNG防污染系統(tǒng)，在PCR反應(yīng)體系配制過程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU堿基的擴增產(chǎn)物。而此產(chǎn)物可以在下次進行PCR反應(yīng)前，由PCR體系中的UNG酶處理消除。這樣就有效的去除了PCR產(chǎn)物的殘留污染，大大降低了由于擴增產(chǎn)物污染而導(dǎo)致的假陽性。UNG酶在PCR循環(huán)中的預(yù)變性步驟即可被滅活，因此不會影響新的含dU堿基PCR產(chǎn)物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一種經(jīng)化學(xué)修飾的、全新熱啟動酶，在常溫下沒有聚合酶活性，有效避免在常溫條件下由引物和模板非特異性結(jié)合或引物二聚體而產(chǎn)生的非特異性擴增，酶的激活須在95℃下孵育10分鐘。獨特的 PCR緩沖體系與熱啟動酶的組合，顯著提高了PCR的擴增效率，熒光信號更強，靈敏度更高，可以檢測單拷貝的模板。使用本產(chǎn)品可以得到更廣的線性范圍，對目的基因定量更準(zhǔn)確。

  ROX染料用于校正定量PCR儀孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 擴增儀。不同儀器的激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)有所不同，因此ROX染料的濃度必須與相應(yīng)的熒光定量PCR儀相匹配。
不需要ROX校正的儀器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的儀器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的儀器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

產(chǎn)品組成：

組份	WE0154-5ml	WE0155-5ml	WE0156-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事項：
1、使用前請上下顛倒輕輕混勻，盡量避免起泡，并經(jīng)短暫離心后使用。
2、避免反復(fù)凍融本品，反復(fù)凍融可能使產(chǎn)品性能下降。本產(chǎn)品長期保存可置于-20℃，避光。如果在短期內(nèi)需要頻繁使用，可在2～8℃保存。


使用方法：
以下舉例為常規(guī)PCR反應(yīng)體系和反應(yīng)條件，實際操作中應(yīng)根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進行相應(yīng)的改進和優(yōu)化。

1、PCR反應(yīng)體系

試劑	50μl反應(yīng)體系	終濃度
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可選)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物濃度以0.2μM可以得到較好結(jié)果，可以在0.1-1.0μM作為設(shè)定范圍的參考。
2)使用的探針濃度，與使用的熒光定量PCR儀、探針種類、熒光標(biāo)記物質(zhì)種類有關(guān)，實際使用時請參照儀器說明書，或各熒光探針的具體使用要求進行濃度的調(diào)節(jié)。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因組DNA或1-10ng cDNA為參照，因不同物種的模板中含有的目的基因拷貝數(shù)不同，可對模板進行梯度稀釋，以確定zuì佳的模板使用量。
4)不同儀器的激發(fā)光學(xué)系統(tǒng)有所不同，根據(jù)使用熒光定量的儀器選擇加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反應(yīng)程序
注意！本產(chǎn)品預(yù)變性反應(yīng)必須在95℃ 10分鐘下完成！

兩步法PCR：

步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
預(yù)變性	95℃	10 min
變性	95℃	15 s	35-40個循環(huán)
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本產(chǎn)品所采用的熱啟動酶須在預(yù)變性95℃、10 min條件下實現(xiàn)酶的活化。
2)建議采用兩步法PCR反應(yīng)程序，若因使用Tm值較低的引物等原因，得不到良好的實驗結(jié)果時，可嘗試進行三步法PCR擴增。

三步法PCR：

步驟	溫度	時間	循環(huán)數(shù)
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
預(yù)變性	95℃	10 min
變性	95℃	15 s	35-40個循環(huán)
退火	55℃-65℃	30s
延伸	72℃	30s

儲存條件：-20℃，避免反復(fù)凍融

根據(jù)您的關(guān)注的BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)，您可能還對以下產(chǎn)品有需求：

貨號	名稱	規(guī)格
BTN80205	DMSO，PCR級	1.5mL
BTN90302	25mM氯化鎂溶液(PCR級MgCl2溶液)	5mL
WE0129	一步法RT-PCR試劑盒	100次
WE0139	一步法Real-Time RT-qPCR試劑盒(高含量ROX校正染料)	100次
WE0159	dNTP混合溶液(10 mM)	1ml|5ml
SY0034	熱啟動PCR Master Mix(含染料)	1ml×5

關(guān)注BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)，的同時，為您推薦更多您可能感興趣的產(chǎn)品：


BTN130840 硫酸鎂溶液(PCR級MgSO4溶液) 5mL
BTN130833 LAMP可見光染料 1mL
WE0111 BaldStar Taq DNA Polymerase 500U|2500U
WE0114 2×BaHF MasterMix(含染料) 5ml
WE0132 cDNA鏈合成試劑盒 100次
WE0133 cDNA鏈合成試劑盒(去除基因組DNA) 100次
WE0149 一步法逆轉(zhuǎn)錄實時熒光定量PCR試劑盒(低含量ROX校正染料) 100次

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