ALH241 2×Pfu PCR Master

產品簡介
2×Pfu PCR Master由專業試劑供應商北京百奧萊博提供,用于科研目的,我公司專注于核酸擴增(PCR)產品的研發、生產和供應,為您提供的2×Pfu PCR Master質量可靠,批間差小,且價格公道,熱切盼望您選購我們的產品。...
產品詳細介紹
特別提示:包括2×Pfu PCR MasterMix在內,本公司的所有產品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫療及其他非科研用途!
產品名稱:2×Pfu PCR MasterMix
產品貨號:ALH241
產品規格:0.5ml|5ml
本品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液,濃度為2×。具有快速簡便、靈敏度高、特異性強、穩定性好等優點,可zuì大限度的減少人為誤差。適用與高保真PCR反應、復雜模板如GC含量高(>60%),有二級結構等的擴增和大規模的基因檢測。本品使用方便快捷,能避免 PCR 操作過程中的污染,使用時只需取適量2×Pfu PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去離子水補足體積,使MasterMix溶液濃度為1×即可進行反應。使用前請保證充分溶解并混勻,操作需在冰上進行 。
產品組分:
Pfu DNA Polymerase(重組酶)——————0.05units/μl
MgCl2-————————————————4mM
dNTPs(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)——————0.4mM
產品應用:
基因檢測:本產品不同批次之間誤差很小,特別適合大規?;驒z測,半定量PCR實驗和微量DNA的檢測。
高保真DNA擴增:如表達基因的克隆、基因的定點突變、細胞內基因點突變的分析(SNP)和末端補平。PCR產物為平端,純化后可加A處理再與TA載體連接或使用平末端克隆載體。
質量控制:
經檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余DNA;能有效地擴增人基因中的單拷貝基因;室溫存放一周,無明顯活性改變。
儲存條件:-20℃。
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名稱:PCR級綠如藍DNA染料
貨號:BTN70909
規格:0.1mL
第二代的非飽和型熒光染料(如SYBR Green I)在高濃度下會抑制熒光PCR,所以反應重復性很不穩定,并且不能用于要求嚴格的Tm分析。本產品跟SYTO9、LC Green、EvaGreen一樣,是第三代飽和型熒光染料,在飽和濃度下也不抑制熒光PCR反應。
產品特點:
1. 飽和濃度不抑制PCR反應,因此得到的熒光信號更強。
2. 抗水解、抗熱解和抗光解的能力強于目前zuì常用的SYBR Green I。
3. 飽和濃度下染料分子沒有機會在DNA分子間發生移位,因此熒光強度跟DNA變性程度呈線性關系,可以用于精細的Tm 測定實驗,如High-resolution melting curve analysis等。
4.跟目前常用的PCR 儀器(包括iCycler、LightCycler、ABI 測序儀)兼容。激發和發射光譜跟FAM和SYBR Green I 接近,可以使用SYBR Green I的光學設置參數。
5. 不能滲透進入細胞內,毒性和致突變性遠低于SYBR Green I。
6.可以用于qPCR、高分辨DNA 溶解曲線分析(HRM、high-resolution DNA melt curve analysis)、毛細管電泳等研究。
儲存條件:常溫運輸、-20℃避光保存,有效期一年。
使用方法:
先將本產品放置在室溫融化,然后震蕩10秒鐘,短暫離心后待用。下面以50μL的標準PCR反應體系為例說明其使用:
1.在一干凈的PCR 管中,加入下列成分:
| 試劑 | 加入量 |
| 10×PCR Buffer(No Mg2+) | 5μl |
| MgCl2 50mM | 2.5μl |
| dNTP 10mM | 1μl |
| 本產品(PCR級綠如藍染料) | 2.5μl |
| Taq DNA聚合酶 | 1-5U |
| DNA模板 | 適量 |
| PCR引物 | 5-50 pmol each |
| 補水到 | 50μl |
2. 放入熒光PCR 儀中進行qPCR,并在退火或延長反應時記錄熒光信號。使用的光學參數可以跟FAM或SYBR Green I 完全一樣。
注意事項:
1. 如果使用iCycler,可以不加FAM;如果使用ABI系統,需要在Well Inspector選項下的非特異參照中選擇“無”;使用LightCycler時,zuì好在PCR 體系中再加入終濃度為0.5mg/mL的BSA以降低儀器對染料和模板的非特異吸附。
2. 如果使用化學修飾過的Taq DNA聚合酶,可能需要減低KCl的濃度并提高Tris的濃度。
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| 貨號 | 名稱 | 規格 |
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