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PCR擴增儀擴增實驗的產檢污染問題

發布時間:2016-08-08瀏覽次數:1929返回列表

PCR擴增儀擴增實驗的產檢污染問題


衛生部為臨床PCR擴增儀實驗室分區的要求是分為:
1)試劑準備區;
2)標本準備區;
3)PCR擴增區;
4)產物分析區。各工作區要有一定的隔離,操作器材專用,人員進出有緩沖間,器材傳遞的方向性也按上述順序進行。切不可將擴增區和產物分析區的產物及器材拿到其它兩個工作區。


PCR擴增儀常見的污染包括:

1)模板污染在核酸提取過程中,由于標本的容器污染、容器外粘有標本、移液器污染和試劑污染等因素造成標本被污染。分子生物學實驗室常常采用克隆質粒作為陽性對照,由于克隆質粒在單位容積內含量很高,且在活細胞內的質粒具有很強的生命力,實驗室中克隆質粒的污染也很常見。

2)PCR擴增儀產物污染 PCR產物拷貝量很大(一般為10的13次方拷貝/ml),而PCR檢測僅需數個拷貝就可以擴增陽性,所以微量的PCR產物污染,就可形成假陽性。其中可能造成PCR產物污染的形式是氣溶膠污染。