摘要：本實(shí)驗(yàn)室已建立1例源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細(xì)胞系, 在此基礎(chǔ)上, 本研究擬對其蛋白表達(dá)特征、染色體核型和致瘤性進(jìn)行探討, 旨在為進(jìn)一步確定胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞的生物學(xué)特性提供依據(jù)。
該文研究1例源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細(xì)胞系的蛋白表達(dá)特征、染色體核型及致瘤性。RPMI-1640有血清擴(kuò)增培養(yǎng)源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細(xì)胞至單層, 分別采用流式細(xì)胞術(shù)或免疫熒光反應(yīng)檢測干細(xì)胞蛋白水平的表達(dá)特征。常規(guī)法制備染色體標(biāo)本, 采用Adobe Photoshop CS6軟件進(jìn)行核型分析。將干細(xì)胞移植在裸鼠體內(nèi), 觀察其致瘤性。
結(jié)果顯示, 該源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細(xì)胞在蛋白水平表達(dá)CK19、NeuroD2、Oct4、 PCNA及Nanog, 不表達(dá)Pdx1、Pax4、Pax6、MafA、Ptf1a、Ngn3、nestin、Sox2、CD34、CD45、 insulin、glucagon、ghrelin、somatostatin及secretin。細(xì)胞是正常的二倍體細(xì)胞(2n=42), 無致瘤性。這表明, 該源于成年大鼠的胰腺導(dǎo)管單克隆上皮樣干細(xì)胞系共表達(dá)CK19、NeuroD2、Oct4、 PCNA及Nanog蛋白。
近年來, 研究者已分離培養(yǎng)源于人、小鼠、大鼠等的胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞, 并對其蛋白表達(dá)等生物學(xué)特性進(jìn)行了探討。例如, 有報(bào)道源于人胎兒的胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞表達(dá)細(xì)胞角蛋白19(cytokeratin 19, CK19)、胰十二指腸同源盒1(pancreatic and duodenal homeobox 1, Pdx1)、 胰 高 血 糖 素(glucagon)和 神 經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白(nestin); 源于小鼠的胰腺導(dǎo)管末端/泡心干細(xì)胞表達(dá)胰腺特異轉(zhuǎn)錄因子1a(pancreas specific transcription factor 1a, Ptf1a)、性別決定相關(guān)同源盒9(sry related HMG box 9, Sox9)、nestin、干細(xì)胞抗原1(stem cell antigen 1, Sca1)、基質(zhì)細(xì)胞源性因子-1(stromal cell derived factor-1, Sdf1)及肝細(xì)胞生長因子受體(c-hepatocyte growth factor receptor, c-Met)。但是, 目前有關(guān)胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞表達(dá)特征的報(bào)道各異, 胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞的特異性蛋白標(biāo)志物還不確定。