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豬ELISA試劑盒試驗時須注意的細節

發布時間:2018-01-08瀏覽次數:1028返回列表

    為了保證實驗的成功,豬ELISA試劑盒試驗時須注意以下的一些細節:
    1、實驗板孔加入試劑的順序應一致,以保證所有反應孔的孵育時間一致。 
    2、固相載體的選擇:許多物質可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維   素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。 
    3、包被抗體或抗原的選擇:將抗體或抗原吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一   般要求PH在9.0~9.6之間。 
    4、酶標記抗體工作濃度的選擇:先用直接ELISA法進行初步效價的滴定。然后再固定其   它條件或采取“方陣法",在正式實驗系統里準確地滴定其工作濃度。
    5、取出板條前恢復到室溫后再打開外包裝袋,實驗中不用的板條立即放回包裝中,密閉封口,其余不用試劑應蓋好。  
    6、實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。  
    7、洗滌過程中反應孔中殘留的洗滌液應在濾紙上充分拍干,勿將濾紙直接放入反應孔中吸水。 
    8、試劑盒內試劑請在保質期內使用,不同批號試劑不要混用。 
    9、酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應,而   本身無色。有些供氫體有潛在的致癌作用,ELIAS試劑盒應注意防護。
    10、1000pg/ml以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。大于1000pg/ml 的樣品應以標準稀釋緩沖液稀釋后重做。在結果分析時,結合考慮相應的稀釋度。
    11、按豬ELISA試劑盒說明書的要求準備實驗中需用的試劑。ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于  洗滌的,應為新鮮的和高質量的。自配的緩沖液應用pH計測量較正。從冰箱中取出的試驗用  試劑應待溫度與室溫平衡后使用。試劑盒中本次試驗不需用的部分應及時放回冰箱保存。

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