-20℃避光保存，一年有效。WST-1粉末溶解后，4℃避光可以保存一周，-20℃避光可以保存半年(宜適當(dāng)分裝，盡量避免反復(fù)凍融)。

注意事項(xiàng)：

? 由于使用96孔板進(jìn)行檢測(cè)，如果細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)間較長(zhǎng)，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。

? 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

使用說明：

1. WST-1溶液的配制：把1毫升電子耦合試劑加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液。WST-1溶液4℃避光可保存一周，而不影響使用效果。短期內(nèi)不使用的WST-1溶液，分裝后可以-20℃避光保存半年(盡量避免反復(fù)凍融)。凍存的WST-1溶液溶解后可能會(huì)觀察到一些沉淀物，這是正常現(xiàn)象，37℃水浴孵育2-10分鐘，通?？梢酝耆芙?。

2. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等因素決定)。按照實(shí)驗(yàn)需要，進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10微升特定的藥物刺激。

3. 每孔加入10微升WST-1溶液。如果起始的培養(yǎng)體積為200微升，則需加入20微升WST-1溶液，其它情況以此類推?？梢杂眉恿讼鄳?yīng)量細(xì)胞培養(yǎng)液和WST-1溶液但沒有加入細(xì)胞的孔作為空白對(duì)照。

4. 在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育0.5-4小時(shí)，對(duì)于大多數(shù)情況，孵育1-2小時(shí)就可以了。時(shí)間長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定，初次實(shí)驗(yàn)時(shí)可以在0.5、1、2和4小時(shí)后分別用酶標(biāo)儀檢測(cè)，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個(gè)時(shí)間點(diǎn)用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。圖3為HT-1080細(xì)胞在不同時(shí)間測(cè)定的細(xì)胞數(shù)量曲線。