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無酶細胞消化液使用說明書

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  • 更新日期:2020-05-14 15:29
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詳細介紹
    無酶細胞消化液不含蛋白消化酶,但能使貼壁細胞與培養(yǎng)瓶皿表面有效脫離達到分離細胞的目的。與常規(guī)胰蛋白酶消化方法相比,無酶細胞消化液作用溫和,不損傷和破壞細胞,不影響細胞生物學特性,是腫瘤細胞在體移植實驗的zui佳細胞脫壁方法。細胞用無酶消化液脫壁后,可直接進行傳代培養(yǎng)或離心收集用于其它實驗。由于未使用蛋白酶制劑,因此特別適于收集細胞進行核蛋白和胞漿蛋白制備、Western Blot、免疫共沉淀實驗,同時能避免樣品蛋白降解,并避免蛋白酶制劑中的RNA酶對RNA的降解。

    特點:

    <室溫孵育10分鐘,貼壁細胞即可從瓶皿脫落,溫和而有效

    <脫壁的細胞可用于連續(xù)傳代

    <培養(yǎng)腫瘤細胞進行在體移植實驗的zui佳消化方法

    <避免蛋白酶過度消化細胞及降解樣品蛋白

    <制備胞核和胞漿蛋白、進行Western Blot、免疫共沉淀

    <避免蛋白酶制劑中污染的RNA酶降解RNA

    包裝:100ml,200ml

    儲存:4oC密封儲存2年。可重復高壓滅菌。

    使用方法:

    1.       用PBS洗滌單層培養(yǎng)細胞,盡可能完全去除瓶中液體。

    2.       加入適量無酶細胞消化液使其覆蓋細胞表面,晃動瓶皿,使所有細胞均充分接觸無酶消化液。

    3.       室溫放置10分鐘或適宜時間,偶爾晃動瓶皿,直到細胞完全脫壁。可加入細胞培養(yǎng)基或2-3倍體積PBS緩沖液終止反應。脫壁后可能有成片細胞連在一起的現(xiàn)象,屬于正常,如用作腫瘤移植,上述情況的產生可利于腫瘤細胞的生長。37oC時脫壁反應會加速。

    4.       500 g 離心5-10分鐘,棄上清,收集細胞。

    5.       收集的細胞可用于:(1) 胞核胞漿蛋白制備;(2) Western blot;(3) 免疫沉淀實驗;(4) DNA-蛋白結合實驗;(5) RNA提取;

    (6) 分瓶傳代。
 
 
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