中文名稱:磷酸鈣法細胞轉染試劑盒
英文名稱:Calcium Phosphate Cell Transfection Kit
產品規格:200T
儲存條件:-20℃,有效期12個月。
用途:用于磷酸鈣法轉染細胞,適合于大多數貼壁細胞的轉染
本試劑盒是在傳統的磷酸鈣細胞轉染方法的基礎上進行了改良,提高了轉染效率,并降低了毒性。用磷酸鈣法轉染細胞,不僅可以瞬時表達,也可以篩選穩定株。本試劑盒足夠轉染不少于200個細胞樣品。
試劑盒組分:
BBS溶液————————20ml
氯化鈣溶液———————20ml
HEK293或HEK293T細胞,即通常所謂的293細胞,是蕞適合磷酸鈣法轉染的細胞之一,優化條件后轉染效率可以高達90%以上;通常很容易達到40-50%左右的轉染效率。大多數常見的細胞例如Hela細胞、CHO細胞等也都適合磷酸鈣法轉染,但效率比293細胞要略低一些。
本試劑盒不僅適合于大多數貼壁細胞的轉染,也適用于一些懸浮細胞的轉染。本試劑盒提供的試劑都經無菌處理,可以直接使用。
注意事項:
1. 轉染時,把DNA-氯化鈣溶液加入到BBS溶液中,不要把BBS溶液加入到DNA-氯化鈣溶液中。
2. 高純度的質粒是獲得高轉染效率的必要條件,要確保A260/A280大于1.8,并且電泳檢測抽提到的質粒90%以上都是超螺旋。
3. 在用磷酸鈣法轉染細胞時應使用濃度不高于5%的二氧化碳,二氧化碳的蕞佳濃度為3%左右。
4. BBS溶液的pH值直接關系到轉染效率,盡量避免把BBS溶液長時間暴露在空氣中,以免被空氣中的二氧化碳酸化。
5. 轉染時由于質粒不同、細胞不同,蕞佳的質粒用量需自行摸索。






