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肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)實驗步驟

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  • 更新日期:2021-06-08 15:20
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詳細(xì)介紹
中文名稱:肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)
產(chǎn)品規(guī)格:2×100mL
用途:肥大細(xì)胞脫顆粒染色
注意事項:甲苯胺藍(lán)法染色,肥大細(xì)胞顆粒呈藍(lán)紫色,細(xì)胞核呈藍(lán)色。
儲存條件:室溫,避光,12個月

產(chǎn)品簡介:
1.肥大細(xì)胞(Mastcell)是疏松結(jié)締組織內(nèi)常見的細(xì)胞,常成群的沿著小血管和淋巴管分布,也常見于支氣管和胰腺的小葉間導(dǎo)管周圍,一般細(xì)胞較大,直徑約為20-30μm,呈圓形或橢圓形,胞核較小、胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大且具有異染性嗜酸性顆粒。
2.甲苯胺藍(lán)(ToluidineBlueO)中的陽離子有染色作用,組織細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)還含有兩個助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類,幫助發(fā)色團(tuán)對組織產(chǎn)生染色力,使切片上的組織細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。肥大細(xì)胞顆粒呈紫紅色,其他呈藍(lán)色。


肥大細(xì)胞染色液(甲苯胺藍(lán)法)操作步驟:
1.取新鮮組織立即固定于10%中性福爾馬林固定液中,常規(guī)脫水包埋;
2.切片厚度4-5μm,常規(guī)脫蠟至水;
3.系列乙醇,自來水洗;
4.入ToluidineBlueOStain,浸染1;
5.自來水稍洗;
6.TBO分化液分化,直至細(xì)胞核和顆粒清晰,可在顯微鏡下控制;
7.自來水稍洗,濾紙吸干或吹風(fēng)機(jī)吹干水分;
8.95%乙醇,無水乙醇,每次;
9.二甲苯透明,中性樹膠封固。

注意事項:
1.針對于胃粘膜組織、軟骨組織等較難著色組織的染色,浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時間應(yīng)相應(yīng)延長;
2.應(yīng)注意組織要新鮮,取出后立即固定;
3.甲苯胺藍(lán)染色后不宜采用低濃度乙醇脫水,否則容易導(dǎo)致褪色;
4.分色后應(yīng)快速入95%乙醇,無水乙醇,二甲苯的時間不宜過久,否則容易導(dǎo)致褪色;
5.染色程度可通過改變?nèi)旧珪r間或染色溫度做適當(dāng)調(diào)整;
6.每次試劑用完后,請迅速蓋好,以免揮發(fā);
7.石炭酸對皮膚、粘膜有強(qiáng)列刺激性和腐蝕性,使用時請穿實驗服并戴一次性手套操作。
 
 
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