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價(jià)格:電議
所在地:福建 廈門市
型號(hào):PuriMag
更新時(shí)間:2024-09-10
瀏覽次數(shù):1268
公司地址:廈門集美杏林營(yíng)運(yùn)中心2樓
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許慧(先生)
I. 簡(jiǎn)介
核苷酸、輔因子和糖蛋白是碳水化合物的代謝衍生物。在結(jié)構(gòu)上,都具有順式-1,2-和1,3-二醇作為常見(jiàn)官能團(tuán)。當(dāng)置于合適pH的硼酸時(shí),二醇轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硼酸酯(如方案1)。將硼酸固定在載體上提供了一種有效的方法,用于從復(fù)雜混合物中分離多種含二醇的生物分子,從小分子到完整的糖蛋白和RNA。利用硼酸酯形成的可逆性,捕獲的化合物可以在溫和的條件下方便地回收用于進(jìn)一步的應(yīng)用或分析。固定化的硼酸與糖(如甘露糖,半乳糖,葡萄糖或核糖)上的鄰位順式 - 二醇基團(tuán)結(jié)合。在結(jié)合和洗滌步驟之后,可以通過(guò)降低pH或通過(guò)添加山梨糖醇將含糖樣品從顆粒洗脫。同樣,固定化的硼酸與含有N-和O-連接寡糖的糖蛋白或糖肽反應(yīng),可以用于純化特定蛋白和多肽?;诖胖楣潭ɑ呐鹚?b>PuriMag G-BA,因其突出的快速磁分離特性,為該過(guò)程提供了大的方便,是分離含二醇的生物分子的有效工具。
純化方案1.硼酸與其相應(yīng)的硼酸酯的解離平衡(pKa?9),它與順式二醇官能團(tuán)反應(yīng)形成的四方硼酸酯易水解??赏ㄟ^(guò)方法1)降低pH解離或通過(guò)方法2)用山梨糖醇競(jìng)爭(zhēng)替代釋放被捕獲的二醇。
II. 產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱:PuriMag G-BA
平均尺寸:0.2 μm (+/- 0.02μm);
濃度:10 mg/ml (w/v: 10 mg/ml in ddH2O, 0.05 % sodium azide);
磁性顆粒含量(每克干固體)> 80%;
III. 緩沖液
? Wash & Binding buffer (W & B buffer): 0.25 M ammo
? Elution buffer: 50 mM Tris, 0.1 M sorbitol, pH 8.5.
Note: Instead of Elution buffer, elution with 75% MeOH co
IV. 產(chǎn)品儲(chǔ)存
本產(chǎn)品在2?8°C儲(chǔ)存后,在購(gòu)買日期后至少可穩(wěn)定1年。將珠粒保存在封閉的小瓶中并保持直立狀態(tài),以防止珠子干燥。不要凍結(jié)產(chǎn)品。使用前使用渦珠懸浮液。 PuriMag G-BA與質(zhì)譜應(yīng)用中常用的溶劑兼容。
V. 通用方案
以下通用方案描述了含有鄰位順式-二醇的分子與PuriMag G-BA的結(jié)合和洗脫操作流程。
1. 在2 ml微量離心管中加入100μl的PuriMag G-BA微球,加入1.0 ml 的W&B緩沖液。將試管置于磁力分離器上,等待30秒鐘,以從上清液中分離珠粒。取出上清液并重復(fù)此步驟兩次。用0.5 ml 的W&B緩沖液完全重懸微球。
2. 將樣品加入微球并用W&B緩沖液填充至zui大體積1ml。
3. 通過(guò)溫和混合(管旋轉(zhuǎn)器)在室溫下孵育15-30分鐘。
4. 將試管放在磁力分離器上,等待30秒鐘,將珠子從上清液中分離出來(lái)。
5. 加入1.5 ml的 W&B緩沖液,充分懸浮,磁分離,棄上清液,重復(fù)洗滌兩次。
6. 加入100μl洗脫緩沖液,渦旋并在室溫下在熱混合器中孵育15分鐘或者中間搖動(dòng)試管。
7. 將試管置于磁分離器上,等待30秒鐘,以從上清液中分離珠粒。將上清液轉(zhuǎn)移至新管中,即為純化后的產(chǎn)物。
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