中文名稱：
丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 可見分光光度法
測定方法：可見分光光度法
測定規格：50管/48樣
保存條件：低溫避光保存
有 效 期：６個月
丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 可見分光光度法產品簡介：
氧自由基作用于脂質的不飽和脂肪酸，生成過氧化脂質；后者逐漸分解為一系列復雜的化合物，其中包括 MDA。通過檢測 MDA 的水平即可檢測脂質氧化的水平。
MDA 與硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)縮合，生成紅色產物，在 532nm 有大吸收峰，進行比色后可估測樣品中過氧化脂質的含量； 同時測定 600nm 下的吸光度， 利用 532nm 與 600nm 下的吸光度的差值計算 MDA 的含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
可見分光光度計或酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量玻璃比色皿或酶標板、研缽、冰和蒸餾水。
丙二醛(MDA)含量檢測試劑盒 可見分光光度法產品內容：
提取液：液體 60mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 15mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：粉劑×2 瓶，4℃保存；
MDA 檢測工作液的配制：用時在每瓶試劑二中加入 7.5mL 試劑一，溶解混勻，4℃保存待用。
注意事項：
1、MDA 檢測工作液較難溶解，可以 70℃加熱，并劇烈 Vortex 以促進溶解。或者通過超聲處理以促進溶解。
2、配制好的 MDA 檢測工作液必須當天使用，因此請根據待測樣本數量用多少配多少。
操作步驟：
一、MDA 提取：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備 ：
收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照每 200 萬細菌或細胞加入 400μL 提取液的比例充分勻漿以破碎并裂解細胞；8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測。 稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液進行冰浴勻漿；8000g 4℃離心 10 分鐘，取上清，置冰上待測。
二、測定操作表：
1、準確吸取 0.3mL MDA 檢測工作液于 0.5mL 離心管中，再加入 0.1mL 粗酶液。
2、混合液在 100℃水浴中保溫 30min 后，立即置于冰浴中冷卻，10000g/min 離心 10min。
3、若用可見分光光度計檢測，則取上清微量玻璃比色皿中，若用酶標板檢測，則吸取 300uL 上清液于 96孔板中，測定各樣品在 532nm 和 600nm 處的吸光度。
注意事項：
1、測定植物組織中 MDA 時受多種物質的干擾。糖與 TBA 顯色反應產物吸收峰在 450nm
處，在 532nm 處也有吸收。因此，測定植物組織中 MDA 時要排除可溶性糖的干擾，需同
時測定樣品在 450nm 處的吸光值。MDA含量計算：
1、細菌、細胞或動物組織中 MDA 含量計算
（1）按照蛋白質含量計算
MDA 含量（nmol/ mg prot）＝6.45×(A532-A600) ÷蛋白濃度（mg/mL）。
（2）按照樣品質量計算
MDA 含量（nmol/ g mass）＝6.45×(A532-A600) ÷樣本質量（g/mL）。
2、血液中 MDA 含量的計算：
MDA 含量（nmol/ L）=6450×(A532-A600)
3、植物組織中 MDA 含量的計算：
（1）按照蛋白質含量計算
MDA 含量（nmol/mg 蛋白）＝[6.45×(A532－A600) －0.56×A450] ÷蛋白濃度（mg/mL）。
（2）按照樣品質量計算
MDA 含量（nmol/g mass）＝[6.45×(A532－A600) －0.56×A450]÷樣本鮮重（g/mL）。
其中 A450、A532、A600 分別為 450nm、532nm、600nm 波長下的吸光值。
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