亞甲基藍(Methylene blue)又稱美藍、次甲基藍、次甲藍等，含水亞甲基藍的分子式為C16H24ClN3O3S，分子量為373.9，CAS號為7220-79-3。亞甲基藍染色液常用于絲綢、紙張、細菌、細胞等染色。因其容易氧化，染色結(jié)果不宜長久保存。

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操作步驟(僅供參考)：

1、樣品處理

①對于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5～10min。

更換新鮮的二甲苯，再脫蠟5～10min。

無水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸餾水2min。

②對于冰凍切片：

蒸餾水2min。

③對于培養(yǎng)細胞：

用4%多聚甲醛固定10min以上。(或采用如下步驟：每25cm²加入PBS/甲醇溶液5mL， 靜置2min，棄液。加入新鮮甲醇5mL，靜置10min，棄液。)

蒸餾水洗滌2min。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2min。

2、亞甲基藍染色

①亞甲基藍染色液(1%)染色3～10min(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。

②用蒸餾水或自來水充分洗滌，進行觀察和拍照。

染色結(jié)果：  

注意事項：

1、第一次使用本試劑時建議先取1～2個樣品做預(yù)實驗。

2、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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