我司TMA-DPH試劑盒是利用TMA-DPH測定膜流動性的熒光探針法，它在脂蛋白及其類似系統(tǒng)的單分子層動力學(xué)研究中特別有用。DPH 及其衍生物（例如TMA-DPH）都呈圓柱形，會發(fā)生基于按長分子軸線平行排列而產(chǎn)生發(fā)射熒光向偶極躍遷。例如，它們對由于周圍脂類相互作用而導(dǎo)致的再定位非常敏感。它們廣泛地被用于旋轉(zhuǎn)運(yùn)動研究中的熒光

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使用方法：

1、染色工作液的配制：

用稀釋液稀釋TMA-DPH 探針1000倍-10000倍，配制成TMA-DPH染色工作液。

【注】：

●也可以不用試劑盒中的稀釋液，直接用HBSS或無血清培養(yǎng)基稀釋即可。

●使用前做預(yù)實(shí)驗(yàn)在推薦濃度范圍內(nèi)測試選定最佳濃度。

●推薦該探針加載濃度在1000-5000倍稀釋，具體的使用濃度需根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求進(jìn)行優(yōu)化。

2、用染色工作液重懸細(xì)胞，在37℃孵育15-30分鐘。

3、用pH7.4 HBSS或20mM HEPES或PBS洗滌細(xì)胞1次。

4、用pH7.4 HBSS或20mM HEPES或PBS重懸細(xì)胞。

5、用該細(xì)胞進(jìn)行檢測。激發(fā)波長 355nm，發(fā)射波長430nm。

按下列公式計(jì)算熒光偏振度P：

P=（I_VV-GI_VH）/(I_VV+GI_VH)

其中校正因子G=I_HV/I_HH

式中：

I_VV:起偏和檢偏器光軸同為垂直方向時測得的熒光強(qiáng)度;

I_VH:起偏和檢偏器光軸分別為垂直和水平方向時測得的熒光強(qiáng)度。

I_HV:起偏和檢偏器光軸分別為水平和垂直方向時測得的熒光強(qiáng)度;

I_HH:起偏和檢偏器光軸同為水平方向時測得的熒光強(qiáng)度。

P值越大,流動性越?。籔值越小，流動性越大。

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